ダニ抗原感作ヘアレスマウスを用いた皮膚炎の誘導とアトピー性皮膚炎研究への応用

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アトピー性皮膚炎はTh2に傾く免疫反応が起されると言われている。アトピー性皮膚炎の患者さんの血清中でIgE抗体が高値になることがしばしば見られる。そのうち、もっとも高頻度に検出できるのはダニ抗原に対する特異的なIgE抗体である。したがって、ダニ抗原はアトピー性皮膚炎の発症に関与している原因の一つと考えられる。一方、マウスではダニ抗原による皮膚炎のモデルは報告されなかったため、今回私は「ダニ抗原感作ヘアレスマウスを用いた皮膚炎の誘導とアトピー性皮膚炎研究への応用」という研究課題に関する研究を開始した。実験方法:ヘアレスマウス、BALB/cマウス,C57B/6マウスを用い、粗製或いは精製したDerf2ダニ抗原をAlum4 mg/mlと混ぜて二週間置きに腹腔内接種にて免疫し、免疫後2週目、4週目、6週目に血清中のIgE抗体値をELISA法で測定した。また脾臓リンパ球数をFACSにて調べた。Th1/Th2免疫反応を起すかどうかを調べるため、CD3陽性T細胞を分離し、抗原存在下で培養し、3日後培養上清中のサイトカイン(IFN-gama,IL-4)産生を測定した。皮膚炎の誘導には免疫したマウスの背部を剃毛してから、セロファンテープで軽く角層に傷づけそれから抗原液を浸みたガーゼを張り付け、隔日交換で二週間まで観察した。まだこのような方法でヘアレスマウスを用い直接皮膚から免疫することも行った。その結果、粗製或いは精製したダニ抗原で免疫したヘアレスマウス、BALB/cマウスにおいて対照群と比べいずれも血中のIgE抗体を検出できなかった。ヘアレスマウスでは直接皮膚から免疫した方法も行ったが、局所リンパ節内の細胞数と皮膚組織内の細胞浸潤が対照群と比べ有意な差は無かったC57B/6マウスにおいては粗製抗原で免疫後4週目から血清中トータルIgE抗体値が軽度の上昇が認められたが、ダニ抗原特異的なIgE抗体値は検出レベル以下だった。脾臓のリンパ球数特にCD3陽性T細胞の増加が見られた。しかし、CD3陽性T細胞が抗原存在下で培養した上清中のサイトカインを測定したところ、ダニ抗原によるTh2サイトカインIL-4の産生が認められなかった。さらに剃毛皮膚に抗原で惹起したところ、著明な皮膚炎反応が観察されなかった。以上の結果より、マウスではダニ抗原による皮膚炎の誘導ができにくいことが分かった。