環境応答型分子集合体を導入した化学発光検出用マイクロDNA分析システムの開発

开发用于化学发光检测的 microDNA 分析系统，结合环境响应分子组装体

• 批准号: 13750745
• 负责人: 谷 博文
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13750745/
• 关键词: DNA; ハイブリダイゼーション; マイクロ分析システム; 両親媒体高分子; 分子集合体; 化学発光; 両親媒性高分子

本年度は,DNAのハイブリダイゼーションに及ぼす会合性高分子の影響について検討した.温度感応型会合性高分子の末端にチオール基を導入し,プローブDNAと同時にシリコン基板に蒸着した金表面上に固定化した.この会合性高分子は加温するとコンパクトに折り畳まれ,冷却すると再び伸長する.したがって,プローブDNAとのアニールに必要な温度に冷却したとき立体的々にハイブリダイゼーションを阻害することが期待される.そこで,これまで行ってきた化学発光法によりハイブリダイゼーション効率ならびに選択性について会合性高分子の影響を検討した.しかしながら,会合性高分子の共存によりDNAの固定化量が大きく低下し,完全に相補性のあるDNAとのハイブリダイゼーションを検出することができなかった.そこで,分子量のより小さい高分子を使用したところ,DNAの結合量が増加し,ハイブリダイゼーションの検出が可能となった.諸条件についてさらに検討し,会合性高分子の相転移温度前後でのハイブリダイゼーションの量を比較したが,顕著な違いは見られず,また相補性の違いを識別することはできなかった.これらの結果から,会合性高分子の同時固定化によるDNAのハイブリダイゼーションの制御が困難であることが明らかとなった.今回の場合,DNAと環境応答型の反応制御を別々に使用したが,例えば両者を結合させたプローブDNAを用いることによりハイブリダイゼーションの制御が可能になるものと考える.一方,会合性高分子共存下における化学発光については,フルオレセインやジブロモフルオレセインを発光基質に用いたところ,相転移温度前後での発光量の顕著な変化が見られた.これにより,会合性高分子を用いた化学発光反応の制御が可能であることが明らかとなった.

This year, the impact of DNA and synthetic polymers was investigated. The temperature sensitive polymer terminal group is introduced, and the temperature sensitive polymer terminal group is evaporated on the gold surface. The polymer is heated, cooled, and elongated. The temperature required for the preparation of the DNA sample was 10 ° C. The temperature required for preparation of the DNA sample was 10 ° C. Therefore, the effectiveness of chemical luminescence and the influence of selective and convergent polymers are discussed. The amount of DNA immobilized in the blue shift of confluent polymers is greatly reduced, and the amount of DNA immobilized in the blue shift of confluent polymers is completely complementary. The molecular weight of the polymer is small, and the binding amount of DNA increases. In this paper, we compare the amount of phase shift before and after phase shift temperature of polymer, and identify the complementary phase shift. As a result, it is difficult to control the simultaneous immobilization of DNA in confluent polymers. In this case, DNA and environmental response to the control of different uses, for example, the use of DNA in combination with the control of different types of DNA. On the other hand, the change in the amount of light emitted before and after the phase shift temperature is observed. The use of synthetic polymers in the chemical reaction of light and control of possible.

项目成果

KAMIDATE, Tamio: "Effect of Mixing Modes on Chemiluminescent Detection of Epinephrine with Lucigenin by an FLA System"Analytical Sciences. 17・8. 951-955 (2001)

KAMIDATE，Tamio：“混合模式对 FLA 系统化学发光检测肾上腺素的影响”分析科学 17・8 (2001)。

Tamio KAMIDATE: "Uptake of Transition Metal Ions Using Liposomes Containing Dicetylphosphate as a Ligand"Analytical Sciences. 18・3. 273-276 (2002)

Tamio KAMIDATE：“使用含有二十六烷基磷酸盐的脂质体作为配体吸收过渡金属离子”18・3（2002）。

TANI, Hirofumi: "Enhancement of the Excluded-Volume Effect in Protein Extraction Using Triblock Copolymer-Based Aqueous Micellar Two-Phase Systems"Analytica Chimica Acta. 429・2. 301-309 (2001)

TANI，Hirofumi：“使用基于三嵌段共聚物的水性胶束两相系统增强蛋白质提取中的排除体积效应”Analytica Chimica Acta 429・2（2001）。

前花 浩志: "金属キレートポリマーを導入したミゼル水性二相分配法におけるヒスチジンタグ融合チトクロムb5及びオリゴペプチドのアフィニティー分配"分析化学. 51・1. 13-19 (2002)

Hiroshi Maebana：“结合金属螯合物聚合物的混合水两相分配方法中组氨酸标记的细胞色素 b5 和寡肽的亲和分配”分析化学 51·1 (2002)。

KAMIDATE, Tamio: "Effect of the Geometry of Microfabricated Flow Reactors on Chemiluminescent Detection of Epinephrine with Lucigenin"Luminescence. 16・5. 337-342 (2001)

KAMIDATE，Tamio：“微型流动反应器的几何结构对光泽精化学发光检测的影响”发光 16・5（2001）。