環境応答型分子集合体を導入した化学発光検出用マイクロDNA分析システムの開発
環境応答型分子集合体を導入した化学発光検出用マイクロDNA分析システムの開発
开发用于化学发光检测的 microDNA 分析系统，结合环境响应分子组装体
批准号：
13750745
负责人：
谷 博文
金额：
$1.41万
依托单位：
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 2002
中文摘要
翻译
本年度は,DNAのハイブリダイゼーションに及ぼす会合性高分子の影響について検討した.温度感応型会合性高分子の末端にチオール基を導入し,プローブDNAと同時にシリコン基板に蒸着した金表面上に固定化した.この会合性高分子は加温するとコンパクトに折り畳まれ,冷却すると再び伸長する.したがって,プローブDNAとのアニールに必要な温度に冷却したとき立体的々にハイブリダイゼーションを阻害することが期待される.そこで,これまで行ってきた化学発光法によりハイブリダイゼーション効率ならびに選択性について会合性高分子の影響を検討した.しかしながら,会合性高分子の共存によりDNAの固定化量が大きく低下し,完全に相補性のあるDNAとのハイブリダイゼーションを検出することができなかった.そこで,分子量のより小さい高分子を使用したところ,DNAの結合量が増加し,ハイブリダイゼーションの検出が可能となった.諸条件についてさらに検討し,会合性高分子の相転移温度前後でのハイブリダイゼーションの量を比較したが,顕著な違いは見られず,また相補性の違いを識別することはできなかった.これらの結果から,会合性高分子の同時固定化によるDNAのハイブリダイゼーションの制御が困難であることが明らかとなった.今回の場合,DNAと環境応答型の反応制御を別々に使用したが,例えば両者を結合させたプローブDNAを用いることによりハイブリダイゼーションの制御が可能になるものと考える.一方,会合性高分子共存下における化学発光については,フルオレセインやジブロモフルオレセインを発光基質に用いたところ,相転移温度前後での発光量の顕著な変化が見られた.これにより,会合性高分子を用いた化学発光反応の制御が可能であることが明らかとなった.
英文摘要
本年度は,DNAのハイブリダイゼーションに及ぼす会合性高分子の影響について検討した.温度感応型会合性高分子の末端にチオール基を導入し,プローブDNAと同時にシリコン基板に蒸着した金表面上に固定化した.この会合性高分子は加温するとコンパクトに折り畳まれ,冷却すると再び伸長する.したがって,プローブDNAとのアニールに必要な温度に冷却したとき立体的々にハイブリダイゼーションを阻害することが期待される.そこで,これまで行ってきた化学発光法によりハイブリダイゼーション効率ならびに選択性について会合性高分子の影響を検討した.しかしながら,会合性高分子の共存によりDNAの固定化量が大きく低下し,完全に相補性のあるDNAとのハイブリダイゼーションを検出することができなかった.そこで,分子量のより小さい高分子を使用したところ,DNAの結合量が増加し,ハイブリダイゼーションの検出が可能となった.諸条件についてさらに検討し,会合性高分子の相転移温度前後でのハイブリダイゼーションの量を比較したが,顕著な違いは見られず,また相補性の違いを識別することはできなかった.これらの結果から,会合性高分子の同時固定化によるDNAのハイブリダイゼーションの制御が困難であることが明らかとなった.今回の場合,DNAと環境応答型の反応制御を別々に使用したが,例えば両者を結合させたプローブDNAを用いることによりハイブリダイゼーションの制御が可能になるものと考える.一方,会合性高分子共存下における化学発光については,フルオレセインやジブロモフルオレセインを発光基質に用いたところ,相転移温度前後での発光量の顕著な変化が見られた.これにより,会合性高分子を用いた化学発光反応の制御が可能であることが明らかとなった.
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KAMIDATE, Tamio: "Effect of Mixing Modes on Chemiluminescent Detection of Epinephrine with Lucigenin by an FLA System"Analytical Sciences. 17・8. 951-955 (2001)
KAMIDATE，Tamio：“混合模式对 FLA 系统化学发光检测肾上腺素的影响”分析科学 17・8 (2001)。
KAMIDATE，Tamio：“混合模式对 FLA 系统化学发光检测肾上腺素的影响”分析科学 17・8 (2001)。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
Tamio KAMIDATE: "Uptake of Transition Metal Ions Using Liposomes Containing Dicetylphosphate as a Ligand"Analytical Sciences. 18・3. 273-276 (2002)
Tamio KAMIDATE：“使用含有二十六烷基磷酸盐的脂质体作为配体吸收过渡金属离子”18・3（2002）。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
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作者：
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通讯作者：
TANI, Hirofumi: "Enhancement of the Excluded-Volume Effect in Protein Extraction Using Triblock Copolymer-Based Aqueous Micellar Two-Phase Systems"Analytica Chimica Acta. 429・2. 301-309 (2001)
TANI，Hirofumi：“使用基于三嵌段共聚物的水性胶束两相系统增强蛋白质提取中的排除体积效应”Analytica Chimica Acta 429・2（2001）。
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DOI：
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发表时间：
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影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
前花 浩志: "金属キレートポリマーを導入したミゼル水性二相分配法におけるヒスチジンタグ融合チトクロムb5及びオリゴペプチドのアフィニティー分配"分析化学. 51・1. 13-19 (2002)
Hiroshi Maebana：“结合金属螯合物聚合物的混合水两相分配方法中组氨酸标记的细胞色素 b5 和寡肽的亲和分配”分析化学 51·1 (2002)。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
KAMIDATE, Tamio: "Effect of the Geometry of Microfabricated Flow Reactors on Chemiluminescent Detection of Epinephrine with Lucigenin"Luminescence. 16・5. 337-342 (2001)
KAMIDATE，Tamio：“微型流动反应器的几何结构对光泽精化学发光检测的影响”发光 16・5（2001）。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
3次元微小流体ネットワークを用いたバイオアッセイシステムの構築
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批准号：17750063
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项目类别：Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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资助金额：$2.3万
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财政年份：2005
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负责人：谷 博文
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依托单位：
ミセル水性二相分配法を用いたタンパク質の高性能分離法の開発
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批准号：09750884
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$1.41万
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财政年份：1997
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负责人：谷 博文
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依托单位：
海外基金