虚血再灌流障害に対するカルディオトロフィン1のアポトーシス抑制と心保護作用

心肌营养素1对缺血再灌注损伤的凋亡抑制和心脏保护作用

基本信息

批准号：
13770368
负责人：
田中康之
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】Cardiotrophin-1(CT-1)はgp130受容体と結合し、JAK-STAT系を活性化させ心肥大を惹起することが知られている。また、gp130受容体の活性化により抗Apoptosis作用を持つAktが増加することも培養心筋細胞系で認められている。昨年度に引き続きin vivo虚血再灌流モデルを作製し、Aktの変化について観察を行う。また、CT-1投与におけるApoptosisの変化や心機能に及ぼす影響について検討を行った。【方法】10-14週令のC57BL/6マウスを用いて心筋梗塞(MI)モデルを作成した。生食投与群とCT-1静脈内投与に分け、術後4週間で血行動態をモニタリングし、実験に供した。心臓超音波検査にて心機能の評価を行った。心臓を取り出し、ホルマリン固定・パラフィン包埋を行い、薄切切片を作製。マッソン染色およびSirius Red染色を行い、心筋線維化の評価を行う。さらにIn situにてDNAの断片化を評価した。また、Aktの蛋白発現量をWestern blot法にて観察するとともに活性化されたAktすなわち、リン酸化Aktを同様にWestern blot法にて観察した。【結果】C57BL/6マウスにおいて、MI群では心筋梗塞後の心機能が著明に低下したのに対し、CT-1投与群では、心機能の改善効果を認めた。さらに、TUNNEL法・DNA ladderにおいてアポトーシスは、CT-1投与群で著明に低下を認めた。コントロール群において減少を認めたAkt及びリン酸化AktはCT-1投与群では減少を認めなかった。組織学的検討の結果CT-1投与群で梗塞周囲の心筋線維化の亢進抑制が認められ、また非梗塞領域の心室壁の肥厚が抑制された。【考察】心筋梗塞後は、抗アポトーシス作用を有するAktの減少に伴い、アポトーシスが増加することにより、心機能が低下すると考えられ、CT-1投与によりAktの減少-アポトーシス減少の経路を介して心筋梗塞後の心機能の低下を抑制することができることが示唆された。また同機序による心筋梗塞後のリモデリング抑制も可能なことが示唆された。

目的：已知心脏营养蛋白1（CT-1）与GP130受体结合，激活Jak-Stat系统并诱导心脏肥大。由于GP130受体的激活，在培养的心肌细胞系中也观察到了它，该培养的心肌细胞线增加了Akt的数量，该AKT的数量是抗凋亡。从去年开始，将产生体内缺血 - 再灌注模型，并观察到Akt的变化。此外，我们研究了凋亡的变化以及CT-1给药期间对心脏功能的影响。方法：使用C57BL/6小鼠在10-14周龄之间制备心肌梗塞（MI）模型。该组分为原始饮食和静脉内CT-1给药，并在手术后四周监测血液动力学，并进行实验。通过心脏超声评估心脏功能。去除心脏，固定福尔马林并嵌入石蜡，制备薄的切片。进行Masson染色和Sirius红色染色以评估心肌纤维化。此外，原位评估了DNA碎片化。此外，使用Western印迹方法观察到Akt的蛋白质表达水平，即使用Western blot方法观察到活化的Akt，即磷酸化的Akt。 [结果]在C57BL/6小鼠中，MI组的心肌梗塞后心脏功能显着降低，而在CT-1组中，心脏功能改善了心脏功能。此外，在CT-1组中，隧道法和DNA梯子中的凋亡显着降低。在CT-1组中未观察到对照组中AKT和磷酸化AKT的降低。组织学检查表明，CT-1辅助组在梗塞周围增加了心肌纤维化，并且抑制了非肢体区域中心室壁的增厚。 [讨论]在心肌梗塞后，由于Akt的凋亡增加而被认为会降低心脏功能，该AKT具有抗凋亡特性，因此建议CT-1给药可以抑制心肌梗死通过减少AKT-吞噬作用减少的途径后心肌梗死后的下降。还建议这种机制也可以在心肌梗塞后抑制重塑。