Notchシグナルにより制御される、造血細胞分化の分子メカニズムについての解析

Notch信号控制造血细胞分化的分子机制分析

• 批准号: 13770571
• 负责人: 石井 源一郎
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East (2002)Chiba University (2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770571/
• 关键词: Notch; MAPK; differentiation

我々は、レトロウイルスベクターであるpMX-IRES-GFPに、活性化型Notch遺伝子(NIC)を組み込み、pMX-NIC-IRES-GFPベクターを作成した。作成されたレトロウイルスベクターを用いて、分化誘導可能な赤白血病細胞株であるK562に、活性化型Notchを遺伝子導入した。その結果、NIC高発現細胞はapoptosisを起こしたが、NIC低発現細胞はコントロール細胞と同程度の増殖能を示した。Notchシグナルの強弱により、apoptosisが調節されている可能性が示唆された。次にNIC低発現細胞(K562-NIC)の巨核球分化について検討した。K562-NICでは、TPA添加による巨核球分化が有意に促進されていた。この分子機構解明のため、TPA添加後のリン酸化MAPKinaseを測定したところ、K562-NICでは、コントロール細胞と較べて明らかにリン酸化MAPKinaseが増加していた。さらに、K562-NICにおける巨核球分化促進は、MAPK inhibitorによりコントロール細胞と同程度まで抑制された。以上より、NotchシグナルによるMAPKの高度活性化が、K562-NICにおける巨核球分化促進の原因と考えられた。NICによるapoptosisおよびMAPKの高度活性化作用は、他種細胞株(NIH3T-3 etc)においても確認され、細胞特異的な現象ではないことが判明した。さらにNotchの標的遺伝子であるHes-1をNIH3T-3に遺伝子導入し、Hes-1を過剰発現するNIH3T-3を作成した。この細胞に、TPAを添加し、リン酸化MAPKinaseを測定したが、コントロール細胞と比べてもMAPKinaseのリン酸化の増強は認めなかった。以上より、NotchシグナルによるMAPKの高度活性化作用は、Hes-1非依存性であることが推察された。

I々は,レトロウイルスベクターであるpMX-IRES-GFPに, activated Notc h NIC (NIC) was produced by the group, and pMX-NIC-IRES-GFP was produced by the company. It has been used to create the されたレトロウイルスベクターを, the differentiation-inducing leukemia cell line であるK562 has been used, and the activated Notch を を を そ子 has been introduced. As a result, NIC has high apoptosis and NIC has low apoptosis, and NIC has low apoptotic cells and has the same degree of proliferative capacity. Notch シグナルのStrength and Weakness により, Poptosis が Regulation されているPossibility がDisplay された. The megakaryosphere differentiation of sub-NIC low-appearing cells (K562-NIC) was carried out. The addition of K562-NIC and TPA can also promote the differentiation of megakaryospheres.このMolecular structure elucidation のため、Measurement of のリン acidified MAPKinaseを after adding TPA したところ、K56 2-NIC では, コントロール cell と compare べて明らかにリン acidified MAPKinase がincrease and していた.さらに, K562-NIC における megakaryosphere differentiation promotion は, MAPK inhibitor によりコントロール cells are inhibited to the same extent. The reasons for the above are the high activation of Notch シグナルによるMAPK and the promotion of megakaryocyte differentiation by K562-NIC. NIC's apoptosis, high activation of MAPK, other cell lines (NIH3T-3 etc.), confirmation of cell-specific phenomena, and identification of cell-specific phenomena.さらにNotchの名的伝子であるHes-1をNIH3T-3に伝子 Importedし、Hes-1をpassed the original NIH3T-3すした.このCell に, TPA を addition し, リン acidified MAPKinase を measurement したが, コンThe acidification of トロール cells is stronger than the acidification of MAPKinase. The above results show that Notch's highly activated MAPK and Hes-1-independent properties have been investigated.

项目成果

Takeuchi Y.Ishii G, et al.: "Interleukin-11 as stimulatory factor for bone formation prevents bone loss with advancing age in mice"J.Biol.Chem.. 277(50). 49011-49018 (2002)

Takeuchi Y.Ishii G等人：“Interleukin-11作为骨形成的刺激因子可防止小鼠随着年龄增长而骨质流失”J.Biol.Chem.. 277(50)。

Fujita Y, Ishii G, et al.: "CD44 signaling through focal adhesion kinase and its anti-apoptotic effect"FEBS Lett.. 528(1-3). 101-108 (2002)

Fujita Y、Ishii G 等人：“通过粘着斑激酶的 CD44 信号转导及其抗凋亡作用”FEBS Lett.. 528(1-3)。