新規ホルモン誘導性転写因子GIOTとその関連因子GIPの性腺における役割

新型激素诱导转录因子GIOT及其相关因子GIP在性腺中的作用

• 批准号: 14770583
• 负责人: 水谷 哲也
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770583/
• 关键词: 卵巣; ゴナドトロピン; GIOT; GIP; 転写因子; クローニング

私共はゴナドトロピン誘導性転写因子Gonadotropin Inducible Ovarian Transcription factor(GIOT)の相互作用タンパク質を同定する中で、転写因子のモチーフであるHNG-Boxを有する新規遺伝子GIP(GIOT-interacting protein)を単離した。そこでGIPの発現様式および機能の解析を行い、以下に示す知見を得た。1, GIPの発現様式をNorthern blottingおよびRT-PCRにより検討したところ、GIPは視床下部-下垂体-性腺系にのみ発現が認められ、特に卵巣に強い発現が認められた。2,卵巣における発現局在をin situ hybridizationにより検討したところ、未成熟卵胞の顆粒膜細胞に発現が限局していた。3,GIPに対する特異的な抗体を作成し、卵巣におけるGIPタンパク質の発現を検討した結果、GIPタンパク質の発現が認められ、さらにその発現は核画分にのみ認められた。4,GFP-GIP融合タンパク質を作成し、細胞内局在を検討したところ、GIPは核に存在した。5,GIPの転写活性化能をmammalian GAL4 one-hybrid systemを用いて解析した結果、GIPは転写活性化能を有し、それはN末端の40アミノ酸に依存していた。これらの結果から、新規転写因子GIPは、未分化顆粒膜細胞において、標的遺伝子の転写を活性化することにより機能していることが示唆された。

A new gene, GIP(GIOT-interacting protein), is identified in the HNG-Box, which contains the Gonadotropin Inducible Ovarian Transcription factor(GIOT). The analysis of GIP's performance and function is shown below. 1. Northern blotting and RT-PCR detection of GIP, GIP detection of hypogonadal gon 2. The development of oocytes in situ hybridization is limited to the development of immature oocytes and granular membrane cells. 3. GIP specific antibody preparation, detection of GIP specific antibody, detection of GIP specific antibody, detection of GIP 4. GFP-GIP fusion is made in nature, and the cellular structure is discussed in detail. GIP exists in the nucleus. 5. GIP's activation energy is dependent on the N-terminal 40 amino acids in the mammalian GAL4 one-hybrid system. The result is that the new gene expression factor GIP is activated in undifferentiated granular membrane cells, and the expression of target genes is activated in cells.

项目成果

Yazawa, T.: "Involvement of cAMP response element binding protein(CREB), steroidogenic, factor 1 (SF-1) and Dax-i in the regulation of gonadotropin inducible ovarian transcription factor 1 (GIOT1) gene expression by FSH in ovarian granulosa cells"Endocrin

Yazawa, T.：“cAMP 反应元件结合蛋白 (CREB)、类固醇生成因子 1 (SF-1) 和 Dax-i 参与卵巢颗粒中 FSH 调节促性腺激素诱导性卵巢转录因子 1 (GIOT1) 基因表达

Yamada, K.: "Functional analysis and the molecular dissection of zinc-fingers and homeoboxes 1 (ZHX1)"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 279. 368-374 (2002)

Yamada, K.：“锌指和同源盒 1 (ZHX1) 的功能分析和分子解剖”Biochem。

Hirano, S.: "Rat ZHX1, a nuclear factor-YA-interacting nuclear protein, forms a homodimer"Gene. 290. 107-114 (2002)

Hirano, S.：“大鼠 ZHX1，一种核因子-YA 相互作用的核蛋白，形成同源二聚体”基因。

Yoshino, M.: "Early growth response gene-1 (Egr-1) regulates the expression of the rat luteinizing hormone receptor gene"Biol.Reprod.. 66. 1813-1819 (2002)

Yoshino, M.：“早期生长反应基因-1 (Egr-1) 调节大鼠黄体生成素受体基因的表达”Biol.Reprod.. 66. 1813-1819 (2002)