乳癌細胞におけるHER-2抗体と化学療法剤のテロメレース活性への影響の検討

检查 HER-2 抗体和化疗药物对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响

• 批准号: 14770626
• 负责人: 野木 裕子
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770626/
• 关键词: telomerase activity; herceptin; breast cancer

Her2過剰発現乳癌細胞株SKBr3を使用し、Herceptinによるtelomelase activityへの影響を検討した。1×105個細胞を濃度10,20nMのHerceptinでそれぞれ24,48,76時間培養した。それぞれのtelomerase assayをTRAPEZETelomerase Detection kitにて試行した。Herceptin単独ではtelomelase activityに変化を認めなかった。次に、同細胞をdoxorubicin, paclitaxel,5-fliorouracil, methotrexateをそれぞれIC50濃度にて24,48,76時間培養した。telomelase activityはやや減少する傾向を認めた。1×105個細胞を濃度20nMのHerceptinでそれぞれ24時間培養後、doxorubicin, paclitaxel,5-fliorouracil, methotrexateをそれぞれIC50濃度、10倍、100倍濃度で添加した。その後24,48,76時間培養し、それぞれFACSにてcell cyucleの解析とRT-PCRおよび、western-blottingにてc-myc、cyclinD1の発現を検討し,telomelase activityを測定した。c-myc、cyclinD1の発現はS期、G2/Mの直前に減少する傾向を認めたが、telomelase activityにはHerceptinを使用したことによる有意な変化を認めなかった。

To investigate the effects of Herceptin on telomelase activity in HER2-overexpressing breast cancer cell line SKBr3 1×105 cells were cultured at concentrations of 10 and 20nM Herceptin for 24, 48 and 76 hours. TRAPEZETelomerase Detection Kit for Telomerase Assay Herceptin is a unique telomelase activity. The same cells were incubated at IC50 concentrations of doxorubicin, paclitaxel,5-fluorouracil, methorexate for 24, 48, and 76 hours. Telomelase activity tends to decrease. 1×105 cells at 20nM Herceptin were incubated for 24 hours, doxorubicin, paclitaxel,5-fluorouracil, methorexate were added at IC50, 10-fold and 100-fold concentrations. After 24, 48 and 76 hours of incubation, FACS analysis of cell cyucle, RT-PCR, Western-blotting analysis of c-myc and cyclinD1,telomelase activity was determined. c-myc, cyclinD1, and telomelase activity were found to decrease in S phase, G2/M phase, and Herceptin phase.