昆虫細胞におけるDNA修復と減数分裂期相同組換え

昆虫细胞中的 DNA 修复和减数分裂同源重组

基本信息

批准号：
14704010
负责人：
日下部宜宏
金额：
$ 18.72万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞は、恒常的に生じる二本鎖DNA切断(DSB)を感知し、細胞周期を積極的に停止することにより損傷修復を行うことが知られている。本研究では、放射線によるDSBに対するカイコ細胞の応答反応を解析し、DSB部位認知の分子機構とこれらの修復機構選択の持つ役割を解明することを目的に研究を行った。特に修復機構については、相同組換え修復(HR)に焦点を絞った。その結果、カイコ細胞は放射線によるDSBが染色体上に生じた後、G_2/M期に細胞周期を停止し、その後、アポトーシスを誘導することなく回復できるため、放射線に対して強い抵抗性を示すことを明らかにした。また、カイコ染色体上でのHR測定系を複数構築し、これらの測定系を用いて、カイコ細胞がDSBの存在部位(染色体のDNA上の損傷か否か)を識別し、異なる経路で修復できる能力を有することを碓認した。この際、染色体上のDSBの修復には、HRを使用し、SSA(Single-Strand Annealing)はほとんど利用されないことが示唆された。さらに、HR修復、細胞周期制御に関わるカイコ遺伝子を多数単離し、その中の一遺伝子がDSBの存在部位の認識に関る新規遺伝子であることを明らかにした。この遺伝子は染色体の構造情報を介して、DSBの存在部位を認識している可能性が示唆された。

已知细胞可以感知组成型双链DNA裂解（DSB），并积极阻止细胞周期进行损伤修复。在这项研究中，我们分析了由于辐射引起的蚕细胞对DSB的反应，并进行了一项研究，目的是阐明DSB位点识别的分子机制以及选择这些修复机制的作用。特别是，重点是同源重组修复（HR）。结果，蚕细胞显示出对辐射的强烈抗性，因为在染色体上引起的辐射引起的DSB后，它们会在G_2/M期间阻止细胞周期，然后可以恢复而不会诱导凋亡。此外，在蚕染色体上构建了多个HR测量系统，并使用这些测量系统，证实蚕细胞具有识别DSB的位置（无论它们是否在染色体的DNA上受损）并通过不同的途径进行修复。目前，建议使用HR来修复染色体上的DSB，并且很少使用SSA（单股退火）。此外，我们分离了许多参与人力资源修复和细胞周期调节的蚕基因，并揭示了其中一个基因是识别DSB位置的一种新基因。有人建议该基因可以通过染色体结构信息识别DSB的位点。

项目成果

期刊论文数量（17）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Mon et al.: "Analysis of extrachromosomal homologous recombination in cultured silkworm cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 312. 684-690 (2003)

Mon等人：“培养蚕细胞中染色体外同源重组的分析”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 312. 684-690 (2003)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Kawaguchi et al.: "Chorion architecture in the Japanese giant silkmoth, Caligula japonica japonica moore"Sericologia. 43. 29-39 (2003)

川口等人：“日本巨型蚕蛾的绒毛膜结构，Caligula japonica japonica moore” Sericologia。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

A method for measuring the efficiency of gene targeting in cultured silkworm cells.

一种测量培养蚕细胞基因打靶效率的方法。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Comp.Biochem.Phys. 139
影响因子：
0
作者：
Ohsaki et al.;Maeda et al.;Maeda et al.;Miyagawa et al.;Kusakabe et al.;Kawaguchi et al.;Lee et al.;Mon et al.
通讯作者：
Mon et al.

Overexpression in Escherichia coli and purification of recombinant CI-b1, a Kunitz-type chymotrypsin inhibitor of silkworm.

家蚕Kunitz型胰凝乳蛋白酶抑制剂重组CI-b1在大肠杆菌中的过表达和纯化。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Protein Expr.Purif. 38
影响因子：
0
作者：
Ohsaki et al.;Maeda et al.;Maeda et al.;Miyagawa et al.;Kusakabe et al.;Kawaguchi et al.;Lee et al.;Mon et al.;Miyagawa et al.;He et al.
通讯作者：
He et al.

Histological observation of eggs of the embryonic lethal mutation, Set, Bombyx mori.

胚胎致死突变、Set、家蚕卵的组织学观察。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
J.Insect Biotech.Seric. 43
影响因子：
0
作者：
Ohsaki et al.;Maeda et al.;Maeda et al.;Miyagawa et al.;Kusakabe et al.;Kawaguchi et al.
通讯作者：
Kawaguchi et al.