家蚕の5齢致死突然変異利用による変態制御機構の解析

家蚕5龄致死突变控制变态机制分析

• 批准号: 11142208
• 负责人: 日下部 宜宏
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11142208/
• 关键词: カイコ; 致死遺伝子; 突然変異; 劣性形質; 終齢致死; 昆虫変態; アポトーシス; 3眠誘導

昆虫の変態は劇的な形態変化を伴いながら、その体内では膨大な種類の生化学反応が巧妙かつ秩序ある制御機構のもとで進行している。蛹期には幼虫組織を崩壊し、積極的に排除する機構が存在し、一方、新たに必要となる組織が形成され、成虫原基の分化と増殖が誘導され始める。これら一連の制御機構の解明をカイコ幼虫致死突然変異、5齢死蚕(lethal last-instar larva : l-li)をモデル系と行った。l-liはホモ個体が5齢3日に一斉に致死することから、幼虫から蛹への変態期において本来崩壊しない組織が細胞死のプログラム異常により崩壊している可能性が考えられた。しかし、5齢3日に死亡したホモ個体の各組織においてはいずれの組織においても顕著なDNAの断片化は認められなかった。そこで、より感度の高いアポトーシス検出法であるLM-PCR法を用いて解析したところ、正常と比較して、中腸においてにアポトーシスが高頻度で観察された。次に誘導3眠蚕においてl-liが終齢致死形質か否かの検討を行ったところ、KK-42処理区において4齢7-8日に28.8%の個体が死亡したことから、l-liは終齢致死形質であると考えられた。誘導3眠蚕においても中腸におけるアポトーシスの亢進が認められたが、5齢期死亡蚕の体液タンパク質プロフィールが正常の5齢2日に相当し、性的成熟に伴うタンパク質の発現が認められない時期であるのに対し、誘導3眠蚕における死亡蚕においては、性的成熟に伴うタンパク質の発現が認められた。これらの結果より、l-liは終齢致死形質ではあるものの、体液タンパク質からみたカイコ発育ステージとの相関は認められなかった。また、中腸タンパク質の2次元電気泳動解析においては、正常と比較して、その発現が増加しているタンパク質スポットが検出されたが、顕著な相違は認められなかった。

Insects の は な form of the play - state - the を with い な が ら, そ の body で は swelled な kinds の biochemistry 応 が clever か つ order あ る system royal institution の も と で for し て い る. Pupal stage に は larva tissue を collapse 壊 し, positive に exclude す る institutions exist が し, one party, the new た に necessary と な る が forms さ れ, adult primordium differentiation と の rights colonization が induced さ れ beginning め る. The <s:1> れら control agency <e:1> explained that the をカ コ コ コ コ larva lethal sudden mutation and the 5齢 dead silkworm (lethal last-instar larva: l-li)をモデ 齢 is of the と line った. L - li は ホ モ individual が に 齢 3, 5 a 斉 に death す る こ と か ら, larva か ら pupa へ の - phase state に お い て collapse originally 壊 し な い organization が cells die の プ ロ グ ラ ム abnormal に よ り collapse 壊 し て い る possibility が exam え ら れ た. し か し 3, 5 齢 に death し た ホ モ individual の organizations に お い て は い ず れ の organization に お い て も 顕 the な の DNA fragment turn は recognize め ら れ な か っ た. そ こ で, よ り sensitivity high の い ア ポ ト ー シ ス 検 out method で あ を る LM - PCR method with い て parsing し た と こ ろ, normal と comparison し て, in intestine に お い て に ア ポ ト ー シ ス が high frequency で 観 examine さ れ た. に induced 3 sleep silkworm に お い て l - li が eventually 齢 lethal character か no か の 検 line for を っ た と こ ろ, KK - 42 処 area に お い て 4 齢 7-8 に 28.8% の individual が death し た こ と か ら, l - li は eventually 齢 lethal character で あ る と exam え ら れ た. Induced 3 sleep silkworm に お い て in も intestinal に お け る ア ポ ト ー シ ス の hyperthyroidism が recognize め ら れ た が, 5 齢 dead silkworm の humoral タ ン パ ク qualitative プ ロ フ ィ ー ル が に quite normal の 5 齢 2 し and sexual maturity に う タ ン パ ク qualitative の 発 が now recognize め ら れ な い period で あ る の に し seaborne, 3 sleep inducing silkworm に お け る dead silkworm に お い て は, sexual maturity Youdaoplaceholder0 accompanied by うタ パ パ in the presence of が identification められた. こ れ ら の results よ り, l - li は eventually 齢 lethal character で は あ る も の の, body fluids, タ ン パ ク qualitative か ら み た カ イ コ 発 yukon ス テ ー ジ と の phase masato は recognize め ら れ な か っ た. ま た, in intestine タ ン パ ク の (2 dimensional electric 気 swimming parsing に お い て は, normal と comparison し て, そ の 発 now が raised し て い る タ ン パ ク qualitative ス ポ ッ ト が 検 out さ れ た が, 顕 な は deemed to recognize め ら れ な か っ た.

项目成果

Kawaguchi, Y. et al.: "Unique chorion structure the mottled gray(mgr)egg, an egg-character mutation of Bombyx mori(Lepidoptera : Bombycidae)"Appl. Entomol. Zool.. 34. 359-364 (1999)

Kawaguchi, Y. 等人：“斑驳的灰色 (mgr) 卵的独特绒毛膜结构，是家蚕（鳞翅目：蚕科）的卵特征突变”Appl。

Kusakabe, T. et al.: "Cys4 zinc-binding motifs in sequence-specific, single-stranded DNA recognition"Proc. Natl. Aca. Sci. USA.. 96. 4295-4300 (1999)

Kusakabe, T. 等人：“序列特异性单链 DNA 识别中的 Cys4 锌结合基序”Proc.

Kawaguchi, Y. et al.: "Effect of ooplasmic size on the larval development as observed in the small egg mutant emi of Bombyx mori."J. Sericult. Sci. JPN.. 68. 245-250 (1999)

Kawaguchi, Y. 等人：“在家蚕小卵突变体 emi 中观察到卵质大小对幼虫发育的影响。”J.

Kusakabe, T. et al.: "Isolation of replicational cue elements from a library of bent DNAs of Aspergillus oryzae"Mol. Biol. Reports. in press. (2000)

Kusakabe, T. 等人：“从米曲霉弯曲 DNA 文库中分离复制线索元件”Mol。

Sugimoto, Y. et al.: "Ovalbumin in developing chicken eggs from egg white to embryonic organs while changing its conformation and thermal stability"J. Biol. Chem.. 274. 11030-11037 (1999)

Sugimoto, Y. 等人：“卵清蛋白在鸡蛋从蛋白到胚胎器官的发育过程中，同时改变其构象和热稳定性”J.