多種哺乳類のAh受容体遺伝子を用いたダイオキシン類の新しい評価法

使用来自不同哺乳动物物种的 Ah 受体基因评估二恶英的新方法

• 批准号: 14760209
• 负责人: 大迫 誠一郎
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Institute for Environmental Studies
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760209/
• 关键词: AhR; Reporter Assay; Bench Mark Dose; Reporter assay

TCDDによる半数致死量(LD_<50>)は動物種ごとに大きく異なるが、これがAhRの潜在的転写能に依存するのか検討するため、数種の哺乳類AhRを同一のレポータージーンアッセイ上で試験し、ベンチマークドーズ(AhR-BMD)を測定した。まず、CHO細胞を用いた系(レポーター:ヒトCYP1A1遺伝子5'上流1500bp)では、感受性の最も低いとされるハムスターではどの用量でも誘導性は見られなず、感受性の著しく異なるとされるマウスの2系統、C57BL/6JおよびDBA/2さらにウサギの3点でBMDは報告されているLD_<50>と相関を示した。しかし、最も感受性の高いモルモットでは776μMと高値であった。また、HeLa細胞を用いた系(レポーター:合成4xXRE-tk)では、AhR-BMDにおいて、ラット>DBA/2マウス>ハムスター>ウサギ>ヒト>モルモット>C57BL/6Jマウスの順に感受性が高く、AhRの潜在的転写活性能と消耗症候群によるLD_<50>との相関性は取れないことが判明した。一方、上記の解析はリガンド非添加群の発現レベル(BA)を基準にしたものだが、このBAはCHP細胞で低BMDを示すDBA/2マウス、ウサギ、モルモット、ハムスター、ラット、ヒトにおいてはすでにC57BL/6Jマウスの最大誘導活性と同一レベルであった。このことはCYP1A1遺伝子の誘導にこれらのAhR分子はリガンド非存在化でも活性を保持していることを示している。C57BL/6Jマウス以外のAhRには共通するC-末端側のペプチト構造がある。そこでこの領域を欠損したDBA/2マウスの変異AhRを用いて同様の実験を行ったところ、BAの低下を示すことが明らかとなった。これはこの領域に、BAレベルを規定する調節機能があることを示している。

The median lethal dose (LD_ ) of TCDD <50>was determined in a variety of animal species, including AhR, and AhR-BMD (AhR-BMD). In CHO cells, the lowest sensitivity was observed in the middle line (1500bp upstream of CYP1A1 gene 5'), and the lowest sensitivity was observed in the middle line (1500bp upstream of CYP1A1 gene 5'). In CHO cells, <50>the The highest sensitivity is 776μM. The sensitivity of C57BL/6J cells to the activity of AhR is high, and the correlation between AhR's potential activity and wasting syndrome is high<50>. The maximum induction activity of C57BL/6J in the presence of non-additive groups (BA) was determined based on the determination of BA and CHP cells with low BMD. The induction of CYP1A1 gene and the activation of AhR molecules are not observed. C57BL/6J has a common C-terminal structure except AhR. The domain is not available to DBA/2. The domain is not available to DBA/2. The adjustment function of the domain and BA is specified.

项目成果

Ohsako S., Kubota K., Kurosawa S., Takeda K., Wu Q., Ishimura R., Tohyama C.: "Alterations of gene expression in adult male rat testis and pituitary shortly after subacute administration of the antiandrogen flutamide."J Reprod Dev. 49. 275-290 (2003)

Ohsako S.、Kubota K.、Kurosawa S.、Takeda K.、Wu Q.、Ishimura R.、Tohyama C.：“亚急性施用抗雄激素氟他胺后不久，成年雄性大鼠睾丸和垂体中基因表达的变化。”

Alterations of gene expression in adult male rat testis and pituitary shortly after subacute administration of the antiandrogen flutamide.

• DOI: 10.1262/jrd.49.275
• 发表时间: 2003-08
• 期刊: The Journal of reproduction and development
• 作者: S. Ohsako;K. Kubota;Shuichi Kurosawa;K. Takeda;W. Qing;R. Ishimura;C. Tohyama

Aryl-hydrocarbon receptor mediated down-regulation of cytochrome P450 side chain cleavage enzyme expression in the adult male mice testis.

芳基烃受体介导成年雄性小鼠睾丸中细胞色素 P450 侧链裂解酶表达的下调。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Mol Cell Endocrinol 221
• 作者: FUkuzawa H.N.;Ohsako S.;Kakaue M.;Baba T.;Tohyama C.
• 通讯作者: Tohyama C.

Comparative uterine gene expression analysis after dioxin and estradiol administration

• DOI: 10.1677/jme.1.01529
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: JOURNAL OF MOLECULAR ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 3.5
• 作者: Watanabe, H;Suzuki, A;Iguchi, T
• 通讯作者: Iguchi, T