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赤血球膜タンパク質band3の構造解析

红细胞膜蛋白带3的结构分析

基本信息

批准号：
14770064
负责人：
阿部義人
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

Band 3タンパク質は真核生物においてのみ保存されているアニオントランスポーターであり、主な機能として赤血球膜上では外の塩素イオンと内の炭酸イオンの交換を行っている。このアニオントランスポーターの機能はこのband3蛋白質の膜貫通ドメインがイオン分子を認識することによるダイナミックな構造変化が関わっており、band3分子の構造がその機能に深くかかわっていることを示している。本研究の目的はBand3の研究を基盤としたポリトピック型アニオントランスポーターの構造またそれに伴った機能の解明である。そのため我々は具体的に以下のような目的をもって研究を行った。1)Band3タンパク質の立体構造解析、2)膜貫通領域peptideの存在状態、3)赤血球膜の老化に伴うタンパク質の構造変化、以上である。1)に関しては、高濃度に精製できる条件、結晶化条件を検討し、現在、低分解能ながら3次元結晶化条件を決定した。今後もさらに分解能を上げるべく条件検討を行っていく。また2)、3)に関しては、赤血球膜タンパク質バンド3のほとんどすべての膜貫通領域(gly361〜val911)のトリプシン消化ペプチドを高感度なMALDI-TOF/MSとLC/MSを利用し、簡便に検出できる系を確立した。その際に、赤血球膜の老化に関わる一つの因子であるメチオニンの酸化をLC/MSを用いて定量的に検出できる方法も確立した。さらに化学修飾とBand3タンパク質のペプチドの検出方法を利用し、アニオントランスポート活性に必須なアミノ酸を同定した。さらにこのペプチドの検出方法はバンド3タンパク質だけでなく、その他の赤血球膜タンパク質の膜貫通ペプチドの検出にも応用できることもわかった。これらの結果は現在論文として投稿し、その一部は国際雑誌Biochemistryに受理された。

In Band 3, eukaryotic cells were conserved and stored. In addition, the host machine was able to detect the presence of carbonic acid on the membrane of red blood cells. In this paper, the band3 protein membrane was used in the laboratory. The molecular mechanism was used to detect the molecular weight of the protein. The chemical reaction was performed. The band3 molecular marker was used to detect the molecular weight of the protein. The purpose of this study is to study the basic information system (Band3). The purpose of this study is to study the basis of this study. The following are the specific reasons for the study of the project. 1) the stereoscopic analysis of the Band3 membrane, 2) the existence of the membrane in the field of peptide, 3) the aging of the red blood cell membrane, the formation of the red blood cell membrane. The main results are as follows: 1) the crystallization conditions are determined by the three-dimensional crystallization conditions, such as temperature, temperature, In the future, the decomposition will be able to improve the conditions. 2), 3) the red blood cell membrane, the red blood cell membrane, the red blood Red blood cell membrane aging, red blood Chemical modification, Band3, chemical modification, chemical modification, determination of acid activity. Please tell me how to use the red blood cell membrane, the red blood cell membrane and the red blood cell membrane. The results of the review show that you can now submit articles and receive a copy of the International Journal Biochemistry.