容量負荷心不全における成長ホルモン受容体の発現と心筋細胞分化への関与

生长激素受体表达及其参与容量负荷性心力衰竭心肌细胞分化

• 批准号: 14770351
• 负责人: 星合 美奈子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Yamanashi (2003)山梨医科大学 (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770351/
• 关键词: 容量負荷心不全; 成長ホルモン; 成長ホルモン受容体; 心筋細胞内カルシウム動態; 未熟心筋細胞

1 容量負荷心不全ラットにおける心機能評価:生後4〜6週のWistarラットを用い容量負荷群およびコントロール群を各15例ずつ作成し、術後4週まで生存した各11例に対して実験を行った。さらに容量負荷に加え成長ホルモン(GH)の直接効果を比較するため、容量負荷+GH投与群11例について検討した。容量負荷群ではコントロールに比べ左室径の拡大、心収縮力の増大がみられた。また、左室拡張末期圧、中心静脈圧は上昇していた。GH投与群ではさらに心収縮力の増大があったが、左室拡張末期圧は上昇していなかった。2 心筋組織学的検索:容量負荷群はコントロール群より左室後壁径が増大しており、心筋の繊維化がgrade2、3までみられたものがそれぞれ11%あった。しかしGH投与群では、grade2以上の繊維化はみられなかった。3 心筋細胞内カルシウム動態の評価:各群3例ずつを用いて評価した。相対的な細胞内Ca流入量、流入速度、および流出速度について検討したが、有意な差はなかった。4 GH受容体(GHR)の定量的評価および局在の同定:容量負荷群、コントロール群各6例ずつを用いた。左室心筋組織からRNA抽出を行いPCR(real time)でGHR発現量を評価した。術後4週では容量負荷群では,GHRが2.3倍発現していた。心筋細胞内でGHRが発現していたが、局在は明確ではなかった。5 容量負荷左室心筋組織中の未熟細胞の評価:シャント作成ラットにGH 3U/kg/dayを連日投与し、投与開始後2、4、8週間後の左室心筋を摘出した。抗CD34抗体、抗Sca-1抗体を使用し各群3例ずつ心筋細胞のフローサイトメトリーを行ったが、いずれも検出されなかった。以上から、容量負荷心筋では心収縮力増大、心筋肥大がありGH投与によるのと同様な反応があること、容量負荷により心筋細胞でのGHR発現量が増大することがわかった。しかし容量負荷とGHによる未熟心筋細胞の出現は、明らかにできなかった。またGH欠損ラットにおける評価を試みたが、シャント作成後の全身状態が不良であり実験不能であった。今後も容量負荷心筋組織中の未熟細胞の出現について、追加実験を行う予定である。

1. Assessment of cardiac function: 15 cases of Wistar rats with volume load group and 11 cases of Wistar rats with volume load group at 4 ~ 6 weeks after birth, and 11 cases of Wistar rats with volume load group and 15 cases of Wistar rats with volume load group at 4 ~ 6 weeks after birth. Capacity load plus growth factor (GH) and direct effect comparison: capacity load +GH input and group 11 cases The volume load group is larger than the left ventricular diameter, and the contraction force is larger than the left ventricular diameter. Left ventricular end-systolic pressure, central venous pressure rise The left ventricular systolic pressure increased significantly in both groups. 2. Histological evaluation of cardiac muscle: volume load group: left ventricular posterior wall diameter increased, cardiac muscle dimension increased from grade2 to grade 3, and heart muscle diameter increased by 11%. For those with grade2 or above, the answer is no. 3. Dynamic evaluation of cardiac muscle cell clusters: 3 cases in each cluster were evaluated. Relative intracellular Ca inflow, inflow rate, and outflow rate are discussed in detail and intentionally. 4. Quantitative evaluation of GH receptor (GHR): capacity load group, 6 cases of each group PCR(real time) and GHR detection in left ventricular tendon tissue were evaluated. At 4 weeks after surgery, the GHR was 2.3 times higher than that of the volume load group. The GHR in the heart muscle cells is clearly visible. 5. Evaluation of immature cells in left ventricular tendon tissue after volume loading: GH 3U/kg/day was administered daily, 2, 4, 8 weeks after administration. Anti-CD34 antibody and anti-Sca-1 antibody were used in 3 cases of each group. The above factors, volume load, heart muscle contraction force increase, heart muscle hypertrophy, GH injection, GHR production increase, volume load, GHR production increase, GHR production increase. The capacity load of immature cardiac muscle cells appeared in the morning and evening. The whole body state after the GH is damaged is not good. In the future, the immature cells in the cardiac muscle tissue will be added to the volume load.