小児感染症の分子生物学的研究

儿科传染病的分子生物学研究

• 批准号: 03F00348
• 负责人: 小林 邦彦
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00348/
• 关键词: ヒトメタニューモウイルス; ウイルス分離; 分子系統樹; モノクローナル抗体; ヒト気管上皮培養細胞; サイトカイン

2001年に発見されたhuman metapnumovirus(hMPV)は、RSウイルス同様に様々な呼吸器疾患(細気管支炎、喘息様気管支炎等)の原因ウイルスとして注目されている。我々の研究グループは本ウイルスの分離法、RT-PCR法によるウイルスゲノムの検出法、蛍光抗体法による抗体検査法を確立して、以下の事項を明らかにしてきた。1.呼吸器感染症患者から採取した咽頭鼻汁ぬぐい液268検体中7検体(2.6%)よりウイルスが分離された。2.咽頭鼻汁ぬぐい液637検体中57検体(8.9%)でRT-PCR陽性であった。3.1か月から35歳までの血清142検体について抗hMPV抗体を検索したところ、抗体保有率は72.5%で、加齢と共に抗体陽性率は上昇した。4.RT-PCR法にてhMPVの存在が証明された患者の急性期と回復期のペア血清中の抗hMPV抗体価を測定したところ、10組中8組で4倍以上の抗体価の上昇を認めた。以上、小児の呼吸器感染症を起こす原因ウイルスのなかで、hMPVは重要な位置を占めていることが明らかになった。これらの研究成果を元に本年度中に達成された、あるいは進行中の研究を列記する。1.分離されたウイルス7株のN,P,M,F,M2,SH,Gの塩基配列を決定して分子系統樹を作製した。これら7株とすでに塩基配列が発表されている3株、計10株は2つの大グループ、4つのサブグループのいずれかに属することを明らかにした。ウイルスの表面糖蛋白のひとつG蛋白は各株間で大きく異なっていたが(33%)、4つのサブグループ内ではよく保たれていた(88-96%)。hMPVの中和抗体を考える上で重要である(投稿中)。2.hMPV感染細胞をマウスに免疫してモノクローナル抗体を作製した。少なくとも4株が得られ、現在characterizationを行っている。3.ヒト気管上皮培養細胞にhMPVを吸着させて、その後感染が成立するか否かを確認する。感染が成立した時、各種サイトカインの発現増強の有無などを検索して、hMPV感染症の病態解析を行う。

2001に発见されたhuman Metapnumovirus (hMPV) is the cause of respiratory diseases (bronchitis, asthma, bronchitis, etc.) and RS is the same as RS. I am researching the グループは本ウイルスの separation method and RT-PCR method によるウイルスゲノムのThe detection method, the light antibody method and the antibody detection method are established, and the following matters are clear and clear. 1. Patients with respiratory tract infections should take 7 of the 268 検 bodies (2.6%) of the pharyngeal and nasal juices ぬぐい liquid and the よりウイルスがisolated された. 2. Among 637 samples of pharyngeal and nasal juice samples, 57 samples (8.9%) were RT-PCR positive samples. 3.1 month old 35-year-old serum 142-body anti-hMPV antibody was detected, the antibody retention rate was 72.5%, and the positive rate of anti-hMPV antibodies was increased. 4. RT-PCR method can be used to prove the existence of hMPV in the serum of patients in the acute phase and recovery phase. The anti-hMPV antibody level was measured, and 8 out of 10 groups showed an increase in antibody level of more than 4 times. Above, the cause of respiratory tract infection in small intestines is the cause, and the important position of hMPV is the cause of the disease. The results of the research have been completed this year, and the research in progress has been recorded. 1. Isolate 7 strains of されたウイルス and prepare a molecular phylogenetic tree based on the base arrangement of N, P, M, F, M2, SH, and G.これら7 strains of とすでに塩婩発表されている3 strains, a total of 10 strains of は2つの大グループ, 4つのサブグループのいずれかに belongs to することを明らかにした.ウイルスのsurface glycoprotein のひとつG protein は で大きくdifferent なっていたが ( 33%), 4つのサブグループ内ではよく宝たれていた(88-96%). The test of hMPV neutralizing antibodies is very important (under submission). 2. The hMPV-infected cells were immunized and antibodies were produced by immunizing the cells. There are 4 strains of なくとも and られ, and now the characterization is done. 3. The adsorption of hMPV into epithelial cells cultured in tubes and the establishment of post-infection infection were confirmed. When the infection is established, various types of infection can become stronger and stronger, and the pathological analysis of hMPV infection can be carried out.

项目成果

Nobuhisa Ishiguro: "Induction of interferon-inducible protein-10 and monokine induced by interferon-γ from human endothelial cells infected with Influenza A virus"Archives of Virology. 149・1. 17-34 (2004)

Nobuhisa Ishiguro：“从感染甲型流感病毒的人内皮细胞中诱导干扰素诱导蛋白 10 和单因子”，病毒学档案 149・1（2004 年）。