魚類における生殖腺性転換の分子メカニズムに関する研究

鱼类性腺性逆转的分子机制研究

• 批准号: 03F03318
• 负责人: 長濱 嘉孝
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03318/
• 关键词: 性的可塑性; 雌雄異体魚; 生殖腺; トランスジェニック; メダカ; エストロゲン; 芳香化酵素; 脳

本研究では、雌雄異体魚を用いて成体(魚)に保持されている生殖腺の性転換メカニズム(性的可塑性の分子メカニズム)を明らかにすることを目的とする。本年度は、先に確立したティラピアの人為的性転換系を用いた形態学的解析に加えて、新たにメダカのトランスジェニック系を開発することを目指した。1)ティラピアの人為的性転換系:これまでの本研究から、ティラピアの雌成体を芳香化酵素阻害剤を含む飼育水で飼うと性転換が誘導され、生殖可能な機能的雄が作出されることが明らかになっている。本年度は更に性ホルモン(エストロゲン、アンドロゲン)処理した後での雌雄生殖腺の形態変化を調べた。その結果、成体に性転換を誘導させるためには個体の性ホルモン同士(エストロゲンとアンドロゲン)の微妙な量的バランスが重要であることが明らかになった。2)メダカのトランスジェニック系の開発:エストロゲン合成酵素である芳香化酵素は雌成体における卵巣の維持に重要な役割を果たす。従って、性転換の分子メカニズムを明らかにするためには芳香化酵素遺伝子の発現調節機構を明らかにする必要がある。そこで本年度は、芳香化酵素の発現を生きたままで観察できるトランスジェニックメダカの開発を試みた。魚類には他の脊椎動物とは異なり2種類(卵巣型、脳型)の芳香化酵素遺伝子が存在するが、先ずこの2種類の芳香化酵素遺伝子をメダカからクローニングし、それぞれのプロモーター領域(8.5kb)をメダカの受精卵に微小注射した後、それらの発現を確認するとともにF1個体の作出を試みた。その結果、卵巣型、脳型ともに、F1個体での発現が確認され、卵巣型は生殖腺のみに、また脳型は脳のみに特異的に発現を示した。今後、さらにF2、F3の作出を行い、GFP芳香化酵素トランスジェニックのライン化を目指す。

In this study, the sex changes of the gonads of dioecious fish were maintained in the adult (fish).メカニズム(sexual plasticity of the molecule メカニズム)を明らかにすることをpurposeとする. This year, we first established the morphological analysis of the man-made sexual intercourse system of したティラピアのに卡えて, 新たにメダカのトランスジェニック线を开発することを目 Refers to した. 1) Artificial sexual intercourse system of ティラピアの: これまでの本 Research から, ティラピアの female adult をaromatase inhibitor Contains breeding water to induce sexual intercourse and reproductive function, and to make the male of the same sex. This year's sex ホルモン (エストロゲン, アンドロゲン) treatment has changed the shape of the male and female gonads and adjusted them.その results, adult sex change を induced させるためには individual の性ホルモン同士 (エストロゲンとアンドロゲン)のsubtle amount of バランスがimportant であることが明らかになった. 2) The メダカのトランスジェニック series: エストロゲン synthetic enzyme Aromatizing enzymes are important for the maintenance of the female body's eggs and are important for the maintenance of the female body.従って、性転のmolecule メカニズムを明らかにするためにはaromatase enzyme legacy 伝子の発existing regulatory mechanism を明らかにするNecessary がある.そこでThis year's は, aromatization enzyme の発appears 生きたままで観看 できるトランスジェニックメダカの开発をtrial みた. Aromatase enzyme residues of 2 types of fish and other vertebrate animals (egg type and shell type) There are 2 types of aromatizing enzymes, namely the するが and the first ずこのの子をメダカからクローニングし、それぞれのプロモーター地(8.5kb)をメダカの Fertilized Eggに微After the small injection, the F1 individual was confirmed and tested.その results, egg type, 脳 type ともに, F1 individual での発appears and confirms され, egg The specific gonad type is the gonad type, and the type is the gonad type. From now on, the products of F2 and F3 will be produced and the GFP aromatase enzyme will be produced.