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魚類におけるエストロゲンによる生殖腺性分化誘導の分子メカニズム

雌激素诱导鱼类性腺性分化的分子机制

基本信息

批准号：
01F00109
负责人：
長濱嘉孝
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、硬骨魚類(ティラピア)を用いて生殖腺と脳の性分化における性ホルモン、特にエストロゲンの役割を明らかにすることを目的としている。昨年度までの研究では、性分化期の前後における遺伝的雌雄の生殖腺と脳における種々遺伝子(芳香化酵素、エストロゲン受容体αとβ、アンドロゲン受容体αとβ、及びAd4BP/SF-1)の発現をRT-PCRを用いて解析した。その結果、生殖腺の性分化に関しては、特に卵巣分化に関して卵巣型芳香化酵素、エストロゲン受容体αとβ、及びAd4BP/SF-1が重要な役割を果たしていることが考えられた。一方、脳の性分化に関してはエストロゲン受容体βとアンドロゲン受容体αが雄化、一方、エストロゲン受容体α、βはいずれも雌化に重要な役割を果たしていることが示唆されたが、他の遺伝子の脳における発現については若干の雌雄差はみられるものの、顕著ではなかった。そこで今年度は、生殖腺と脳の性分化におけるセロトニン合成系の関与を検討した。これまでの研究から、孵化直後のXYティラピア稚魚をセロトニン合成酵素であるトリプトファンハイドロキシレース(l-トリプトファンを5-OH-Lトリプトファンに転換する酵素)(TRH)の阻害剤であるPCPAを含む飼育水中で飼うと雌化することが分かっていた。従って、セロトニンは脳の雄化に関与する可能性が考えられた。そこで、本研究では、このTRH遺伝子をティラピアの生殖腺と脳からクローニングするとともに、そのmRNAの発現を性分化期前後における生殖腺と脳においてRT-PCRにて詳しく解析した。その結果、以下の興味ある結果が得られた。すなわち、生殖腺では遺伝的雌雄にかかわらず孵化直後から発現がみられ、顕著な雌雄差は認められなかった。一方、性分化期の脳におけるTRHの発現には顕著な雌雄差が観察された。遺伝的雌では、孵化直後に弱い発現が認められた以外は、孵化後5-90日の間ではほとんど発現はみられなかった。これとは対照的に遺伝的雄では、孵化後5日にTRHの発現が開始し、10日でもっとも強くなり、15日には弱まり、その後はほとんど発現が消失した。脳におけるこのようなTRH mRNAの発現パターン(性分化における一過性の発現)の雌雄差は、TRHが脳の雄化に関与することを示唆していて、きわめて興味深い。今後、このTRHとエストロゲンやアンドロゲン合成との関連、特に芳香化酵素遺伝子発現との関連、さらには性行動などとの関連についても研究を進める予定である。

In this study, the sexual differentiation of the gonads of teleost fishes was used. Sex ホルモン, 特にエストロゲンのservice cut を明らかにすることをpurpose としている. Last year's research on the male and female gonads of the year before and after the sexual differentiation period, the gonads of the male and female gonads (aromatizing enzyme, エストロThe Ano acceptor αΨβ, the Anocon acceptor αΨβ, and the Ad4BP/SF-1) were analyzed using RT-PCR. Result of gonad, sexual differentiation of gonads, special ovum differentiation, ovum-type aromatase, ovum-type aromatase The receptors α and β and Ad4BP/SF-1 are important. On the one hand, the sexual differentiation of 脳の成してはエストロゲンReceiverβとアンドロゲンReceiver The body α is masculine, one side, the body α, beta is feminized, and the body is heavy It is necessary to cut the fruits of the disease, and to show off the fruits of the disease.る発appears that there is a slight difference between male and female, はみられるものの, and there is a ではなかった.そこでThis year's は, gonad と脳のsexual differentiation におけるセロトニン Synthetic system のrelated and を検した.これまでの Research から、After hatching, のXY ティラピアlarvae をセロトニン合Into enzyme Inhibitor of を5-OH-L Tetrahydrofuranase (TRH)であるPCPAをcontainsむfeedingwaterでfeedうとfeminizationすることが分かっていた.従って, セロトニンは脳の男化に关 and する possibility が考えられた.そこで、This studyでは、このTRH缝子をティラピアのgonadsと脳からクローニングするとともに、そのmRNA の発appears におけるgonad と脳においてRT-PCR detailed analysisした before and after the sexual differentiation stage. The result of その, the following の interesting taste ある results が got られた.すなわち, the male and female にかかわらず of the gonad では伝 hatches and the から発appears がみられ, and the male and female difference はcognizes the められなかった. On the one hand, the stage of sexual differentiation is の脳におけるTRH. The remaining female is still alive, and it is weak and weak immediately after hatching. The male of the これとは対毾毾毾毯毯, the male では of the に伝, 5 days after hatching, the にTRH の発appears and starts し, 10 days after hatchingでもっとも强くなり, 15日には weak まり, その后はほとんど発appears and disappears した.脳におけるこのようなTRH mRNA の発 appear パターン(sexual differentiation におけるtransient 発appear) のsexual difference は, TRH's male enhancement and することをshows していて and きわめてinteresting deep い. From now on, このTRHとエストロゲンやアンドロゲン is related to the synthesis of special aromatizing enzymes The relationship between the child and the relationship between the child and the sexual behavior is the same as the relationship between the child and the relationship. The research is done and the decision is made.