ゼブラフィッシュにおける性決定・分化の分子メカニズム

斑马鱼性别决定和分化的分子机制

• 批准号: 03F03107
• 负责人: 長濱 嘉孝
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03107/
• 关键词: 性分化; DMRT1; ゼブラフィッシュ; セルトリ細胞; 生殖腺; 精巣分化カスケード; 性決定; 魚類

ゼブラフィッシュは発生研究の生物モデルとして広く用いられているが、生殖腺の性分化メカニズムに関する研究は遺伝的性の不安定さが原因で殆ど進んでいない。本研究では、ゼブラフィッシュの性分化メカニズムを明らかにするとともに、現在動物における性分化研究でもっとも注目されているDMドメイン遺伝子の機能についても解析する。本年度は、DMRT1遺伝子に焦点を絞り、性分化時における発現、さらには標的遺伝子の探索を行った。1)性分化時におけるDMRT1遺伝子の発現:孵化後のいろいろな時期(0〜60日)における個体毎のDMRT1遺伝子の発現をRT-PCRで調べたところ、0〜5日までは全ての個体でDMRT1の発現が少量認められたが、10〜15日では約50%の個体で発現が更に上昇した。その後も同様に約50%の個体でDMRT1遺伝子の発現が高く、残りの約50%の個体での発現は低かった。また、in situ hybridizationを用いた解析からDMRT1の発現は生殖腺に限定されていることが分かった。ゼブラフィッシュではこれまで生殖腺の雌雄が形態学的に区別できるのは孵化後20日以降と考えられてきたが、本研究の結果から遺伝的にはもっと早く雌雄が決定されている可能性が強く示唆された。2)DMRT1の標的遺伝子の探索:DMRT1の標的遺伝子はまだ不明である。そこで本研究では、セルトリ細胞が発現していないゼブラフィッシュのセルトリ細胞株にDMRT1遺伝子を強制発現させることで新たに発現する遺伝子を解析した。その結果、アンドロゲン合成酵素を含む4種の遺伝子がDMRT1により特異的に発現を促進されることが分かった。これらの遺伝子はDMRT1遺伝子の下流に働く精巣分化カスケードにある遺伝子の有力候補と考えられるので現在更にゼブラフィッシュの性分化における発現パターンを解析している。

ゼブラフィッシュは発生 Research のbiotic モデルとして広く用いられているが、gonad のThe reason for the sexual instability of sexual differentiation is the reason for the research on sexual differentiation. This research is about sexual differentiation, sex differentiation, and animal life.けるSexual Differentiation ResearchでもっともAttentionされているDMドメイン伝子のFUNCTIONについてもANALYSISする. This year, DMRT1 The focus of the legacy of the legacy is the twist, the gender differentiation time appears, and the focus of DMRT1 is the exploration of the legacy. 1) When sexual differentiation occurs, the individual DMRT1 remains unchanged during the post-hatching period (0 to 60 days) RT-PC Rで片べたところ、0～5日までは全てのINDUSTRIAL でDMRT1の発appearがa small amount It is recognized that on the 10th to 15th day, about 50% of the individual data will be updated and the number will rise.その后も同様にAbout 50% of the individuals are でDMRT1 伝子の発现が高く, and residual りのAbout 50% of the individuals are での発appears and is low った.また, in situ hybridization を Use いた analysis から DMRT1 の発appear は gonad に limit されていることが分かった.ゼブラフィッシュではこれまでGonad の Male and female が Morphological difference できるのは Test after 20 days after hatching The results of this study are based on the results of this study. 2) Exploration of DMRT1’s legacy: The legacy of DMRT1 is unknown. This research is based on the results of this research The cell strain is DMRT1 and it is forced to be analyzed.そのRESULTS, アンドロゲンzyme synthesis enzyme をむ4 kinds of の伝子がDMRT1 によりspecific に発appears to promote されることが分かった.これらの缝子はDMRT1 伝子のdegradable に働くejī壣differentiationカスケードにある缝子のstrong candidateと考えられるのでNow moreにゼブラフィッシュの性differentiationにおける発行パターンをanalyticsしている.