内在性膜タンパク質と脂質膜相互作用の単一分子力学

完整膜蛋白和脂质膜相互作用的单分子动力学

基本信息

  • 批准号:
    03F03362
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.09万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

膜タンパク質と細胞膜の相互作用を理解するためにも、また細胞膜からタンパク質を採取・同定する技術を完成して脂質とタンパク質の相互作用を定量的に測定する必要がある。膜タンパク質と脂質膜の相互作用は強すぎるので結合定数を測定することは難しい。そこで本研究課題では、ナノテクノロジーを推進する技術として原子間力顕微鏡を使用することにより、生細胞の膜から膜タンパク質を引き抜く力を測定する技術を確立するため、細胞膜、リポソームおよびLB膜からの膜タンパク質および疎水性ペプチドの引き抜き実験を企画し、現在までに次の実績を得ている。1.赤血球およびそのゴースト膜は主要膜タンパク質としてバンド3タンパク質とグリコフォリンをそれぞれ100万個の単位で含有している。原子間力顕微鏡の探針をシラン化後、アミノ基に反応性を持つ共有結合性架橋剤により修飾しておき、細胞膜に接触することにより、細胞膜上のアミノ基と探針を共有結合により結合できる。細胞膜上のアミノ基の主要部分はバンド3とグリコフォリンの持つリシンのアミノ基であるため、架橋生成後探針と試料間の距離を増すことにより、探針に結合した膜タンパク質が細胞膜から引き抜かれる。このときの引抜き力を探針のついているバネの変位として測定したところ、平均値として200ピコニュートンという値を得た。またゴースト膜を試料にした場合は、300ピコニュートンという値を得た。これらの値は、グリコフォリン引き抜きに要する力として従来発表されている25ピコニュートンという値を大きく上回る値である。リポソームおよびLB膜からのタンパク質引き抜きは現在進行中であるが、すくなくとも100ピコニュートン以上の力を要することが確認されている。
Membrane タ ン パ ク qualitative と membrane の interaction を understand す る た め に も, ま た membrane か ら タ ン パ ク qualitative を take, be す を る technique し て lipid と タ ン パ ク qualitative の interaction を quantitative determination of に す る necessary が あ る. The membrane タ パ パ パ the interactivity of the yroid と lipid membrane <s:1> is very strong すぎる the で binding number を is difficult to determine, and the する と と is difficult to <s:1>. そ こ で this research topic で は, ナ ノ テ ク ノ ロ ジ ー を propulsion す る technology と し て interatomic force 顕 micromirror を use す る こ と に よ り の, cell membrane か ら membrane タ ン パ ク qualitative を lead き sorting measure を く forces す る technology を establish す る た め, cell membrane, リ ポ ソ ー ム お よ び LB film か ら の membrane タ ン パ ク qualitative お よ び 疎 water-based ペ プ チ ド の lead き sorting き Experience: を project を, current: までに times <s:1> achievements: を て る る. 1. The red blood cell お よ び そ の ゴ ー ス ト film は main film タ ン パ ク qualitative と し て バ ン ド 3 タ ン パ ク qualitative と グ リ コ フ ォ リ ン を そ れ ぞ れ 1 million の 単 containing a で し て い る. Interatomic force 顕 micromirror の probe を シ ラ ン after, ア ミ ノ base に anti 応 sex を hold つ mutual combination bridge tonic に よ り modified し て お き, cell membrane に contact す る こ と に よ り, membrane の ア ミ ノ base と probe を mutual combination に よ り combining で き る. Membrane の ア ミ ノ base の main part は バ ン ド 3 と グ リ コ フ ォ リ ン の hold つ リ シ ン の ア ミ ノ base で あ る た め, bridge formation, probe と の distance between sample を raised す こ と に よ り, probe に combining し た membrane タ ン パ ク qualitative が membrane か ら lead き sorting か れ る. こ の と き の led sorting き force を probe の つ い て い る バ ネ の - a と し て determination し た と こ ろ, average numerical と し て 200 ピ コ ニ ュ ー ト ン と い う numerical を た. ま た ゴ ー ス ト membrane を sample に し た は, 300 ピ コ ニ ュ ー ト ン と い う numerical を た. こ れ ら の numerical は, グ リ コ フ ォ リ ン lead き sorting き に to す る force と し て 従 to 発 table さ れ て い る 25 ピ コ ニ ュ ー ト ン と い う numerical を big き く last る numerical で あ る. リ ポ ソ ー ム お よ び LB film か ら の タ ン パ ク quality led き sorting き は now underway で あ る が, す く な く と も 100 ピ コ ニ ュ ー ト を ン above の force to す る こ と が confirm さ れ て い る.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Pretransition and progressive softening of bovine carbonic anhydrase II as probed by single molecule atomic force microscopy
  • DOI:
    10.1110/ps.041282305
  • 发表时间:
    2005-06-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    8
  • 作者:
    Afrin, R;Alam, MT;Ikai, A
  • 通讯作者:
    Ikai, A
Force spectroscopy of covalent bond rupture vs. protein extraction.
共价键断裂与蛋白质提取的力谱。
Extraction of Membrane Proteins from Living Cell Surface Using the Atomic Force Microscope and Covalent Crosslinkers
使用原子力显微镜和共价交联剂从活细胞表面提取膜蛋白
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  • 作者:
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猪飼 篤其他文献

High-field ESR using SQUID magnetometer
使用 SQUID 磁力计进行高场 ESR
  • DOI:
    10.1088/1742-6596/334/1/012058
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    日高 敦;志賀 嘉仁;関口 博史;猪飼 篤;長田 俊哉;Misao Sasaki;T.Sakurai
  • 通讯作者:
    T.Sakurai
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
    猪飼 篤
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ikai;A.;Afrin R.;and H. Sekiguchi;細道和夫;川畑博;Kuroda J.;月田早智子;Tohru Eguchi;Sachiko Tsukita;猪飼 篤
  • 通讯作者:
    猪飼 篤
Non-gaussianity from inflation, The Unity of the Universe
通货膨胀的非高斯性,宇宙的统一性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    関口 博史;森 泰啓;猪飼 篤;Misao Sasaki
  • 通讯作者:
    Misao Sasaki
包接化合物保護ナノ粒子を用いた省エネ高性能液晶表示素子の開発
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    谷口 昌宏;西川 治;猪飼 篤;川村 和孝;中岡 慎太郎;白石幸英
  • 通讯作者:
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使用原子力显微镜进行配体:受体相互作用的分子和细胞水平研究
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  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
内在性膜タンパク質と脂質膜相互作用の単一分子力学
完整膜蛋白和脂质膜相互作用的单分子动力学
  • 批准号:
    03F00362
  • 财政年份:
    2003
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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    $ 1.09万
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  • 资助金额:
    $ 1.09万
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  • 批准号:
    09241211
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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  • 批准号:
    04205039
  • 财政年份:
    1992
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
高機能性クリ-ンワワチンの開発
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  • 批准号:
    03205038
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
免疫系細胞の賦活化を促する抗原提示能強化型人工抗原の開発
开发具有增强抗原呈递能力的人工抗原,促进免疫系统细胞的激活
  • 批准号:
    02205041
  • 财政年份:
    1990
  • 资助金额:
    $ 1.09万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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  • 批准号:
    62220009
  • 财政年份:
    1987
  • 资助金额:
    $ 1.09万
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  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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  • 批准号:
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  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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