骨形成促進効果を有する機能性ペプチドの探索とその生理機序

寻找促进骨形成的功能肽及其生理机制

• 批准号: 03J01544
• 负责人: 小酒井 貴晴
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J01544/
• 关键词: 骨分化; 骨芽細胞; 骨形成; マメ科植物; エンドセリン; 短絡電流; Ussing-chamber; 小腸上皮組織

骨形成促進効果を有する機能性ペプチドを探索するために、以下の実験を行った。まず、サンプル調整のため、マメ科植物(大豆、下大豆、ピジョンピー、富貴豆)を、エタノールおよび水で抽出した。エタノール抽出物はDMSOで溶解し、実験に用いた。一方、水抽出物は、遠心分離して得た上清から脱塩処理するために、限外濾過フィルターに通した。調整したサンプルをマウス骨芽細胞の培養液中に添加し、細胞分化を検討した。分化マーカーは、アルカリフォスファターゼおよび沈着カルシウム化合物とした。分化誘導処理は3もしくは5日とした。どのマメ科植物抽出物もアルカリフォスファターゼ活性を減少させた。この結果はマメ科植物抽出物は分化誘導能が低いということを示している。しかし、沈着カルシウム化合物の量は、どの処理区でも変化しなかった。この原因はカルシウム沈着までには相当日数が必要であるからであろう。ペプチドは腸管で消化されにくい。ペプチドホルモンであるエンドセリンに骨分化誘導効果があることが示されているが、ペプチド分子の腸管吸収機能は不明な点が多い。そこで、エンドセリンをモデルとして腸管上皮の吸収能およびイオン輸送に及ぼす影響を検討した。Ussing-chamberに固定したマウス小腸上皮組織を用いて、短絡電流条件下において、エンドセリンが及ぼす影響を観察した。その結果、エンドセリンは血液側に添加した時のみ、塩化物イオンの分泌を促進した。しかし、腸管側に添加した時は影響しなかった。よって、エンドセリンは吸収されにくいが吸収されたエンドセリンは塩化物イオン分泌を促進することが明らかになった。本実験結果から、マメ科植物からの粗抽出物は骨芽細胞分化能が低いことが明らかになった。また、エンドセリンをモデルとした実験から、生理活性ペプチド分子は吸収されくいことが明らかになった。

Bone formation promotion results are functional. The plants of the family (soybean, etc.) are extracted from the soil. The extract was dissolved in DMSO, and the solvent was used. A side, water extract, remote separation, separation, purification, purification To adjust the culture medium of bone bud cells, add the cell differentiation method The separation of the two groups of people is very important. Differentiation treatment 3 days ago The plant extracts were removed from the soil. As a result, the plant extracts of the family can be induced to differentiate. The amount of the compound in the reaction zone was reduced to 100%. The reason for this is that the number of days is necessary. The intestines are digested. The effect of bone differentiation induction is unknown. The function of intestinal tract absorption is unknown. The effect of the absorption and transport of the intestinal epithelium was investigated. Using-chamber fixation and short-circuit current were observed. As a result, the secretion of the compound was promoted when it was added to the blood side. When the intestine is added, it will affect the body. The first step is to promote the secretion of chemicals. The crude extract of this plant has a low differentiation ability. The most important thing is that we should not lose sight of the fact that we are not living in the same place.