赤痢菌エフェクターIpgBによる上皮細胞侵入と細胞間拡散機構の解明

志贺氏菌效应子 IpgB 阐明上皮细胞侵袭和细胞间传播机制

• 批准号: 03J10601
• 负责人: 大屋 賢司
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J10601/
• 关键词: 粘膜病原細菌; 細胞侵入性細菌; 赤痢菌; III型分泌機構; エフェクター; 細胞骨格; III型分泌

本研究では、赤痢菌の感染初期動態を明らかにする目的で、本菌の感染に中心的な役割を果たしていると推定されるipgB1およびB2遺伝子群に着目し研究を行っている。今年度は特にipgB1遺伝子に着目し以下の成果を得た。1)IpgB1は宿主細胞に直接分泌される昨年度までに、IpgB1は赤痢菌感染時のラッフル膜形成に関与することを明らかにしている。C末端にMycエピトープタグを付与したIpgB1を分泌する赤痢菌を作製し、HeLa細胞へ感染させたところ、IpgB1は赤痢菌の感染後、菌体周囲およびラッフル膜に局在することが明らかとなった。2)IpgB1のラッフル膜誘導領域の探索昨年度までに、GFP-IpgB1のトランスフェクションによって宿主細胞にラッフル膜が誘導されることを確認している。IpgB1の各種欠失変異体を作製しGFP-IpgB1のラッフル膜誘導領域を探索した。その結果、IpgB1のN末端53アミノ酸領域をのぞく全領域がラッフル膜誘導には必要なことが明らかとなった。3)IpgB1によるラッフル膜誘導機構の解明IpgB1によるラッフル膜誘導がRac1、Cdc42活性化に依存しているか検討した。IpgB1によるラッフル膜形成はrac1、cdc42のsiRNA導入、またRac1、Cdc42の阻害剤であるGGTI-298処理により抑制されることが明らかとなった。GFP-IpgB1のトランスフェクションによりRac1、Cdc42活性化が認められた。さらにIpgB1欠損株感染では、野生株、IpgB1過剰発現株感染と異なりRac1、Cdc42活性化が認められなかったことから、IpgB1は赤痢菌感染時にRac1、Cdc42を活性化させラッフル膜形成を誘導する、細胞侵入に必須の新規エフェクターであることを明らかにし現在論文投稿中である。

In this study, the dynamics in the early stage of infection of Shigella dysenteriae and Shigella dysenteriae showed that the purpose of the study was clear, and the fruit of the center of the infection of this bacteria was "cut". It was presumed that the subgroup of "ipgB1" and "B2" was aimed at the purpose of the study. This year's special ipgB1 is looking at the following "achievements". The main results are as follows: 1) the host cell of IpgB1 directly secreted the antigen of last year, and the membrane was formed when IpgB1 was infected with Shigella dysentery. After the infection of Myc dysentery and IpgB1 dysentery at the C-terminal, IpgB1 secreted Shigella dysenteriae, HeLa cells infected with Shigella dysenteriae, IpgB1 Shigella dysenteriae, the periphery of the bacteria were infected. 2) in the field of IpgB1 system, the field of exploration of last year's market, the GFP-IpgB1 system, the host cell, the membrane, the cell, the cell, the membrane, the membrane. IpgB1 is responsible for the exploration of various kinds of underdeveloped materials in the field of GFP-IpgB1. The results show that the N-terminal of IpgB1 has an important effect on the membrane of the whole field of acid. 3) the IpgB1 system is responsible for understanding that the membrane is responsible for the activation of Rac1 and Cdc42. The IpgB1 membrane forms rac1, cdc42, siRNA, Rac1, Cdc42, block, GGTI-298, inhibit, detect, treat, block, block, The GFP-IpgB1 was activated by Rac1, Cdc42 and so on. The infected strains of IpgB1, wild strains, IpgB1 strains, infected strains, active strains of Rac1, active strains of Cdc42, Rac1 and Cdc42 of Shigella dysenteriae infected with Shigella flexneri, and the positive cells of E. coli were found in the articles submitted in this paper.