細胞侵入性細菌毒素による歯周病態モデルの構築と歯周病予防法への応用

利用细胞侵袭性细菌毒素构建牙周病模型及其在牙周病预防方法中的应用

• 批准号: 16791339
• 负责人: 秋房 住郎
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16791339/
• 关键词: cytolethal distending toxin; 歯周疾患; 予防歯科; Actinobacillus actinomycetemcomitans; 糖脂質; 分子生物学; 細胞侵入性細菌; 歯周病; 予防方法

歯周病原性細菌Actinobacillus actinomycetemcomitans(A.a菌)は、免疫担当細胞や上皮細胞に感染して、各種毒素によりアポトーシスを誘導することが知られている。本研究では、A.a菌が産生する細胞膨化致死毒素(Cytolethal Distending Toxin ; CDT)に注目し、CDTが細胞障害を誘導するために必要と考えられる細胞への結合・内在化に関する機序について、細胞分子生物学手法を用いて解析した。CDTは、CdtA、CdtB、CdtCの3つのサブユニットから構成され、活性サブユニットであるCdtBが宿主細胞の核内へ移行し、染色体を傷害することで細胞分裂周期をG2期で停止させた後アポトーシスを誘導する。各サブユニットのリコンビナントタンパクを精製・蛍光標識して蛍光顕微鏡で観察したところ、CdtBが細胞膜を移行するためには他のサブユニットが必要であり、CdtBの内在化はBrefeldin Aにより細胞内輸送を停止させると阻害されたが、CDT各サブユニットの細胞膜上への結合は阻害されないことが観察された。また、CdtAとCdtCは細胞内膜を移行しなかった。CDTの細胞膜レセプターを検索するため、薄層クロマトグラフィーを用いてCDT各サブユニットと結合する糖脂質を検索したところ、CdtAはGM1、GM2、GM3、Gb4と、CdtBはGM1、GM2、Gb3、Gb4と、CdtCはGM1、GM2とにそれぞれ結合した。続いて各ガングリオシドを組み込んだリポソームを作成し、CDTと吸着実験したところ、GM3は濃度依存的にCDTの細胞障害を阻害した。GM3と結合するサブユニットはCdtAのみであったことから、CDTのレセプターとしてGM3が関与していることが示唆された。

歯 weeks pathogenic bacteria Actinobacillus actinomycetemcomitans (A.a bacteria) bear は, immune cells や epithelial cells に infection し て, toxins に よ り ア ポ ト ー シ ス を induced す る こ と が know ら れ て い る. In this study, で で and A.a bacteria が produce する Cytolethal Distending Toxin; CDT) に attention し, CDT が cells handicap of を induced す る た め に と necessary test え ら れ る cells へ の combination, internalization に masato す る machine sequence に つ い て, cell and molecular biology technique を い て parsing し た. CDT は, CdtA, CdtB, CdtC の 3 つ の サ ブ ユ ニ ッ ト か ら constitute さ れ, active サ ブ ユ ニ ッ ト で あ る CdtB が へ within the host cell の nuclear migration し, chromosome を damage す る こ と で を cell division cycle G2 で stop さ せ た after ア ポ ト ー シ ス を induced す る. Each サ ブ ユ ニ ッ ト の リ コ ン ビ ナ ン ト タ ン パ ク を refined · 蛍 light logo し て 蛍 light 顕 micromirror で 観 examine し た と こ ろ, CdtB が membrane を transitional す る た め に は he の サ ブ ユ ニ ッ ト が necessary で あ り, CdtB の internalized は Brefeldin A に よ り intracellular delivery を stop さ せ る と resistance against さ れ た が, CDT サ ブ ユ ニ ッ ト の membrane へ の combining は resistance against さ れ な い こ と が 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0, CdtAと, CdtC, intracellular membrane を, graft な った. CDT の membrane レ セ プ タ ー を 検 cable す る た め, thin layer ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を with い て CDT each サ ブ ユ ニ ッ ト と combining す る sugar lipid を 検 cable し た と こ ろ, CdtA は this, GM2, GM3, Gb4 と, CdtB は this, GM2, Gb3, Gb4 と, CdtC は this, GM2 と に Youdaoplaceholder0 combined with た. 続 い て each ガ ン グ リ オ シ ド を group み 込 ん だ リ ポ ソ ー ム を し, consummate the CDT と sorption be 験 し た と こ ろ and GM3 は concentration dependent に CDT の cells handicap of を resistance against し た. GM3 と combining す る サ ブ ユ ニ ッ ト は CdtA の み で あ っ た こ と か ら, CDT の レ セ プ タ ー と し て GM3 が masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Influence of treatment with multi-appliance on caries risk in orthodontic patients.

多矫治器治疗对正畸患者龋齿风险的影响。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Dentistry in Japan 40
• 作者: Fusanori Nishimura;et al.;Koji Mise;Sumio Akifusa;Sumio Akifusa;Takeshi Ohba et al.;Tomoko Hamasaki et al.
• 通讯作者: Tomoko Hamasaki et al.

Mechanism of internalization of the cytolethal distending toxin of Actinobacillus actinomycetemcomitans

• DOI: 10.1099/mic.0.27671-0
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: MICROBIOLOGY-SGM
• 影响因子: 2.8
• 作者: Akifusa, S;Heywood, W;Henderson, B
• 通讯作者: Henderson, B

Evaluation of the relationship between periapical lesions/sclerotic bone and general bone density as a possible gauge of general health among 80-year-olds

评估根尖周病变/硬化骨与一般骨密度之间的关系，作为 80 岁老年人总体健康状况的可能衡量标准

• 发表时间: 2005
• 期刊: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 99
• 作者: Ohba T;Takata Y;Ansai T;Morimoto Y;Tanaka T;Kito S;Hamasaki T;Akifusa S;Takehara;T
• 通讯作者: T

Relationship of number of remaining teeth to health-related quality of life in community-dwelling elderly.

• DOI: 10.1111/j.1741-2358.2005.00059.x
• 发表时间: 2005-06-01
• 期刊: Gerodontology
• 影响因子: 2
• 作者: Akifusa, S;Soh, I;Takehara, T
• 通讯作者: Takehara, T

Involvement of ganglioside GM3 in G2/M cell cycle arrest of human monocytic cells induced by Actinobacillus actinomycetemcomitans cytolethal distending toxin

• DOI: 10.1128/iai.73.8.4846-4852.2005
• 发表时间: 2005-08-01
• 期刊: INFECTION AND IMMUNITY
• 影响因子: 3.1
• 作者: Mise, K;Akifusa, S;Takehara, T
• 通讯作者: Takehara, T