DNAチップを用いた哺乳類生殖腺の性分化におけるエピジェネティック機構の解析

利用 DNA 芯片分析哺乳动物性腺性别分化的表观遗传机制

• 批准号: 03J11341
• 负责人: 水上 拓郎
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J11341/
• 关键词: 性分化; Sry; Sox9; エピジェネティック; col9a3; Whole mount in situ hybridization; DNAのメチル化; エピジェネティックス; 5-Azacytidine; Trichostatin A; ヒストンのアセチル化; セルトリ細胞; 生殖腺

哺乳類の性分化過程において、Sry,Sox9といったDNAに結し、クロマチン構造を変化させる遺伝子が、胎仔期の僅かな時間に発現することで精巣分化が誘導されるが、これらの遺伝子の標的は10年経った現在も不明瞭であった。このようなクロマチンを介した遺伝子発現制御は近年、エピジェネティック制御といわれ、多くの遺伝子発現制御のみならず、発生・細胞分化、免疫、癌化等に関わっている事が明らかとなっていた。そこで、DNAのメチル化や、ヒストンのアセチル化といったエピジェネティック制御が性分化過程において関与するか否かを、器官培養系を用い解析した。その結果、精巣分化過程において、ヒストンの脱アセチル化酵素阻害剤であるTrichostatin Aは精巣分化自体には影響を与えないが、構成細胞の増殖や分化に影響を与えている事が明らかとなった。以上の結果から、ヒストンのアセチル化は性分化自体より、生殖腺の発生・成長などに関与している事が示唆された。一方、DNAのメチル化の阻害剤である5-Azacytidineは、精細管形成を阻害し、オスの性分化を特異的に抑制した。DNAのメチル化パターンの変化は、セルトリ細胞の分化や、ライディッヒ細胞の分化自体には影響を与えないが、その細胞の局在には異常が認められた。そこで、これらの細胞の配置に深く関わっている細胞外基質の形成に異常があると考え、laminin-1や、Collagenの遺伝子をWhole mount in situ hybridization法によって明らかにした。その結果、Col9a2,3の遺伝子発現が抑制されている事が明らかとなり、性分化過程にエピジェネティックな制御が関与することを世界で初めて証明した。

During the process of breast-feeding sexual differentiation, the process of breast-feeding sexual differentiation, the results of DNA tests, the establishment of artificial pregnancy, and the 10-year cycle of pregnancy during the fetal period are not clear at present. In recent years, people have been able to control the disease in recent years. In recent years, they have been able to control the disease, such as cell differentiation, immunity, cancer, and so on. In the process of sexual differentiation, the process of sexual differentiation was analyzed, and the organ culture system was used to analyze the process of sexual differentiation. DNA was used in the process of sexual differentiation. The results of the experiment, the process of sperm differentiation, the process of sperm differentiation, the inhibition of Trichostatin A by enzyme, the differentiation of autologous cells, the formation of cells, the formation of cells, the process of differentiation, the process of sperm differentiation, the enzyme enzyme, the enzyme enzyme. The above results showed that sexual differentiation, gonadal growth, and pregnancy. On the one hand, DNA inhibits the formation of 5-Azacytidine, the seminal tubule forms the blockage, and inhibits sexual differentiation. DNA cells differentiate into cells, cells differentiate from cells, and cells differentiate from each other in the same way. The configuration of the cell, the cell, the Whole mount in situ hybridization, the Whole mount in situ hybridization. The results of the experiment, the results of the Col9a2,3 assay and the results showed that the inhibition of the disease, the process of sexual differentiation, the regulation of the process of sexual differentiation, the beginning of the world, the beginning of the world.