IP_3Rと会合する新規チロシンリン酸化基質BANKによる細胞増殖制御機構の解明

与IP_3R相关的新型酪氨酸磷酸化底物BANK阐明细胞增殖控制机制

• 批准号: 03J61524
• 负责人: 横山 一剛
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61524/
• 关键词: チロシンリン酸化; IP_3受容体

本研究では非受容体型チロシンキナーゼの生理機能を明らかにすることを目的として、チロシンキナーゼ標的分子の解析をおこなった。そのうちのひとつBANKについて、B細胞への過剰発現によりB細胞抗原受容体刺激後の細胞内プールからのカルシウム動員を調節することを明らかにしてきた。本年度の研究実績の概略は以下のようである。1、BANKはIP_3受容体と会合するが、この会合に必要なBANKのアミノ酸領域を明らかにした。この領域は、ショウジョウバエにおけるBANK類縁分子Dofの機能ドメインとも一致することが明らかになった。BANKファミリーのタンパク質はankyrin repeatとcoiled coil領域のみが特徴的なモチーフ構造であるが、これらとは違う新しいDBBドメイン(BANK-BCAP-Dofドメイン)の存在を明らかにし、IP_3受容体機能制御との関連を示唆した。Dofは従来Grb2との会合によりシグナルを伝えられると考えられていたが、これらの結果からBANKファミリーは全てIP_3受容体を調節することで機能していると考えられる。2、BANKのマウスオルソログをクローニングし、アミノ酸配列を明らかにした。またマウスBANKに対する特異的な抗体を作成し、他のシグナル伝達分子との相互作用について検討した。さらにBANKの染色体構造を明らかにし、BANK遺伝子欠損マウスの作成の進行を試みた。3、BANKの類縁分子を探す過程においてBANKと同様にチロシンリン酸化される新規タンパク質NYAN1を同定した。NYAN1に対する特異的抗体を作成し、NYAN1もまたチロシンリン酸化されていることを確認した。さらにNYAN1遺伝子欠損マウスを作製し、NYAN1がp85を介するPI3Kの活性化に関して最も重要な分子ファミリーを形成することを明らかにした。

This study で は than by capacity size チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の physiology を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ target molecular の を お こ な っ た. そ の う ち の ひ と つ BANK に つ い て, B cell へ の before turning 発 now に よ り under let body B cell antigen の cells after プ ー ル か ら の カ ル シ ウ ム mobilization を adjust す る こ と を Ming ら か に し て き た. The <s:1> research achievements <s:1> of this year are roughly as follows ようである. 1, BANK は IP_3 meet the capacity of body と す る が, こ meet の に な necessary BANK の ア ミ ノ acid field を Ming ら か に し た. こ の は, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ に お け る BANK class try molecular Dof の function ド メ イ ン と も consistent す る こ と が Ming ら か に な っ た. BANKファ ファ リ リ ファ タ タ パ パ chiroplasm リ ankyrin repeatとcoiled Coil area の み が of 徴 な モ チ ー フ tectonic で あ る が, こ れ ら と は violations う new し い DBB ド メ イ ン (BANK - BCAP - Dof ド メ イ ン) exist の を Ming ら か に し, IP_3 let body function suppression と の masato even を in stopping し た. Meet Dof は 従 to Grb2 と の に よ り シ グ ナ ル を 伝 え ら れ る と exam え ら れ て い た が, こ れ ら の results か ら BANK フ ァ ミ リ ー は full て IP_3 を adjustment by let body す る こ と で function し て い る と exam え ら れ る. 2, BANK の マ ウ ス オ ル ソ ロ グ を ク ロ ー ニ ン グ し, ア ミ ノ acid with column を Ming ら か に し た. ま た マ ウ ス BANK に す seaborne る specific antibody を な make し, he の シ グ ナ ル 伝 operatives と の interaction に つ い て beg し 検 た. The chromosome structure of さらにBANK <s:1> is を clear らに に に, and the underdamage of BANK 伝 offspring is ウス さらに to form a chromosome for を test みた. 3, BANK の class try molecular を agent す process に お い て BANK と with others に チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ る new rules タ ン パ ク qualitative NYAN1 を be し た. NYAN1 に す seaborne る specific antibody を し, consummate NYAN1 も ま た チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ て い る こ と を confirm し た. さ ら に NYAN1 heritage 伝 son owe loss マ ウ ス を as し, NYAN1 が p85 を interface す る PI3K の activeness に masato し て も most important molecular フ な ァ ミ リ ー を form す る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Altered gene expression in the adult brain of fyn-deficient mice

• DOI: 10.1023/b:cemn.0000012720.71630.14
• 发表时间: 2004-02-01
• 期刊: CELLULAR AND MOLECULAR NEUROBIOLOGY
• 影响因子: 4
• 作者: Goto, J;Tezuka, T;Yamamoto, T
• 通讯作者: Yamamoto, T

中沢, 横山 他: "p250GAP, a novel brain-enriched GTPase-activating protein for Rho family GTPases, is involved in the N-methyl-d-aspartate receptor signaling."Mol Biol Cell.. 14(7). 2921-2934 (2003)

Nakazawa、Yokoyama 等人：“p250GAP 是 Rho 家族 GTP 酶的一种新型脑富集 GTP 酶激活蛋白，参与 N-甲基-d-天冬氨酸受体信号传导。”Mol Biol Cell.. 14(7)。 -2934 (2003)

谷口, 横山 他: "p250GAP, a neural RhoGAP protein, is associated with and phosphorylated by Fyn."Biochem Biophys Res Commun.. 306(1). 151-155 (2003)

Taniguchi、Yokoyama 等人：“p250GAP 是一种神经 RhoGAP 蛋白，与 Fyn 相关并被 Fyn 磷酸化。”Biochem Biophys Res Commun. 306(1) (2003)。

横山一剛: "新遺伝子工学ハンドブック"羊土社. 4 (2003)

横山和义：《新基因工程手册》Yodosha 4 (2003)。