神経伝達物質に応答して蛍光を発する新規細胞型センサー

一种新型细胞型传感器,可响应神经递质发出荧光

基本信息

  • 批准号:
    15750072
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では,生細胞の形質膜中に存在する受容体蛋白質を用い,同受容体の神経伝達物質の結合に伴う構造変化を検出する方法を開発すると共に,それを利用した新規細胞型センサーの開発を行った.1.受容体蛋白質として神経伝達物質のアドレナリンに対する受容体(β_2AR)を用いた.C末ループの71残基を欠損させたβ_2ARのC末端にCFP,そして第三細胞内ループ内に重ヒ素化蛍光色素FlAsHが結合するCCPGCC配列を導入した遺伝子を作成した(β_2AR229C:FP,β_2AR238CFP,β_2AR250CFP).各遺伝子をHEK293細胞に発現させた後,FlAsHで標識したところ,β_2AR250CFPにおいてCFP-FlAsH間のFRET効率が最大の値を示した.さらに,β_2AR250CFPでは,アドレナリンを添加するとFRET効率が減少し,続いて,阻害剤のICI 118,551を添加するとFRET効率の減少がおさまり,神経伝達物質に応答性を示すことが分かった.以上より,細胞型センサーの開発に成功した(投稿中).2.基板上の任意の位置に細胞を配置する技術の開発を行った.この目的のために,光分解性保護基を有する単分子膜で修飾したガラス基板を用いた.この基板に細胞接着を抑制するウシ血清アルブミンをコートした後に,光照射すると,アルブミンが表面より解離することを見出した.続いて,細胞接着を促進するフィブロネクチンを添加すると,フィブロネクチンが光照射領域に選択的に吸着し,細胞接着面が形成されること分かった.この方法を用い,一細胞を基板上の任意の位置に配置することに成功した(JACS).1,2に基づき,様々な神経伝達物質に対する細胞型センサーを集積化することで,極微少量の神経伝達物質をリアルタイムで網羅解析することが可能になると期待される.
This study で は, living cells の に exist in plasma membrane す る を use い let body protein, with the capacity of body の god 経 伝 of material の に with う structure - the を 検 out す る method を open 発 す る と に, そ れ を using し た new rules on cell type セ ン サ ー の open 発 を line っ た. 1. The capacity of body protein と し て god 経 伝 of material の ア ド レ ナ リ ン に す seaborne る by let body (beta _2AR) を い た. At the end of the C ル ー プ の 71 residues を owe loss さ せ た beta _2AR の C terminal に CFP, そ し て third intracellular ル ー プ に heavy ヒ element within the 蛍 light FlAsH が pigment combination す る CCPGCC match column を import し た を son 伝 It becomes た(β_2AR229C:FP,β_2AR238CFP,β_2AR250CFP). The heritage 伝 son を HEK293 cells に 発 now さ せ た, FlAsH で logo し た と こ ろ, beta _2AR250CFP に お い て CFP - FlAsH between の FRET sharper rate が biggest の numerical を shown し た. さ ら に, beta _2AR250CFP で は, ア ド レ ナ リ ン を add す る と FRET sharper rate reduce し が, 続 い て, resistance against の ICI 118551 を add す る と FRET の sharper rate reduce が お さ ま り, god 経 伝 of material に 応 を and shown a sex す こ と が points か っ た. Above よ り, cell type セ ン サ ー の open 発 に successful し た (contribute). 2. The substrate の arbitrary の position に cells を す る technology の open 発 を line っ た. こ の purpose の た め に, light decomposability protection base を have す る 単 で molecular membrane modified し た ガ ラ ス substrate を with い た. こ の substrate に cells then を inhibit す る ウ シ serum ア ル ブ ミ ン を コ ー ト し た に after light す る と, ア ル ブ ミ ン が surface よ り dissociation す る こ と を shows し た. 続 い て, cells then を promote す る フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン を add す る と, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン が に light field of sentaku に し, cell surface が then form さ れ る こ と points か っ た. こ の way を い, a cell を substrate の arbitrary position の に す る こ と に successful し た (JACS). 1, 2 に base づ き, others 々 な God 経 伝 of material に す seaborne る cell type セ ン サ ー を set product change す る こ と で, very very の god 経 伝 of material を リ ア ル タ イ ム で snare parsing す る こ と が may に な る と expect さ れ る.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
先端の分析法 -理工学からナノ・バイオまで-
尖端分析方法——从科学和工程到纳米/生物——
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Naoya INOUE;Toshiyuki KIMURA;Takanori NISHINO;Katsunobu ITOU;Yoshinori Okade;Yanagiya Y;前田瑞夫
  • 通讯作者:
    前田瑞夫
細胞を固定化した基板の作製方法およ び基板
固定化细胞的基材的制造方法及基材
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

中西 淳其他文献

先端医療シリーズ37 「人工臓器・再生医療の最前線」 第18章 再生医療の基盤技術 4.微細加工技術, p.321-324
先进医学系列37《人造器官与再生医学的前沿》第18章再生医学的基础技术4.微细加工技术,p.321-324
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    J.Nakanishi;T.Takarada;S.Yunoki;Y.Kikuchi;M.Maeda;宝田 徹;中西 淳;小林 純;小林 純;K.Itoga et al.;小林純;岡野光夫;大和雅之 (分担執筆);小林純 (分担執筆)
  • 通讯作者:
    小林純 (分担執筆)
温度応答性材料による細胞シート工学
使用温度响应材料的细胞片工程
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    J.Nakanishi;T.Takarada;S.Yunoki;Y.Kikuchi;M.Maeda;宝田 徹;中西 淳;小林 純
  • 通讯作者:
    小林 純
温度応答性表面による細胞シート工学の創生
使用温度响应表面创建细胞片工程
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    J.Nakanishi;T.Takarada;S.Yunoki;Y.Kikuchi;M.Maeda;宝田 徹;中西 淳;小林 純;小林 純
  • 通讯作者:
    小林 純
俳句指導の実践的考察
俳句教学的实际考虑
細胞シート工学と再生医療への応用
细胞片层工程及其在再生医学中的应用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    J.Nakanishi;T.Takarada;S.Yunoki;Y.Kikuchi;M.Maeda;宝田 徹;中西 淳;小林 純;小林 純;K.Itoga et al.;小林純;岡野光夫
  • 通讯作者:
    岡野光夫

中西 淳的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('中西 淳', 18)}}的其他基金

Development of sustainable liquid interfacial culture system and its medical applications
可持续液体界面培养体系的开发及其医学应用
  • 批准号:
    23K17481
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
深層学習モデルを用いた類語学習支援システムの開発とその学習効果の検証
利用深度学习模型开发同义词学习支持系统并验证其学习效果
  • 批准号:
    23K12254
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
系の力学的特性を利用した劣駆動系ロボットの効率的な運動学習制御
利用系统的机械特性对欠驱动机器人进行高效运动学习控制
  • 批准号:
    23K03762
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Development of bioinert hierachical materials for exploring cellular mechanosensing of liquid scaffolds
开发生物惰性分层材料以探索液体支架的细胞机械传感
  • 批准号:
    22H00596
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
脳卒中片麻痺患者におけるリハビリテーション介入による神経組織再構築機序の解明
中风偏瘫患者康复干预阐明神经组织重塑机制
  • 批准号:
    20K11244
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
感性の涵養とコミュニケーション能力育成のための国際的俳句指導の探究
培养敏感性和发展沟通能力的国际俳句教学探索
  • 批准号:
    20K02736
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
機能性遺伝子探索のための一細胞の光単離法
用于功能基因搜索的单细胞光隔离方法
  • 批准号:
    17700417
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
蛋白質構造変化に基づく酵素活性のバイオイメージング法の開発
基于蛋白质结构变化的酶活性生物成像方法的开发
  • 批准号:
    00J08880
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
作文教育改善のための生成論的作文指導の研究
提高写作教育的生成写作教学研究
  • 批准号:
    09780187
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
作文教育改善のための生成論的作文指導の研究
提高写作教育的生成写作教学研究
  • 批准号:
    08780194
  • 财政年份:
    1996
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

相似海外基金

新しい蛍光相関計測法による生体高分子ダイナミクスの不均一性と階層性の解明
使用新的荧光相关测量方法阐明生物聚合物动力学的异质性和层次结构
  • 批准号:
    23K21102
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
分子分散・凝集の両状態で高効率発光する有機蛍光体の合理的設計開発と極限ドープ応用
有机荧光粉的合理设计开发和极端掺杂应用,可在分子分散和聚集状态下发出高效光
  • 批准号:
    23K26628
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
化学遺伝学蛍光センサーシリーズの開発による多色・多標的細胞イメージング
通过开发化学基因荧光传感器系列进行多色和多目标细胞成像
  • 批准号:
    23K26794
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
第2、3の生体窓と高次非線形光学効果を駆使した深部超解像蛍光イメージング
利用第二和第三生物窗和高阶非线性光学效应的深度超分辨率荧光成像
  • 批准号:
    23K25178
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
極高エネルギー宇宙線観測のための自律トリガー可能な次世代大気蛍光望遠鏡の開発
开发能够自主触发极高能宇宙线观测的下一代大气荧光望远镜
  • 批准号:
    24K07073
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
半導体量子ドット集合系での超蛍光発生機構における量子揺らぎの観測と制御
半导体量子点组装系统中超荧光产生机制中量子涨落的观测与控制
  • 批准号:
    24K06929
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
LEDを使用した副甲状腺自家蛍光イメージング機器の開発
LED甲状旁腺自发荧光成像装置的研制
  • 批准号:
    24K19335
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
蛍光イメージングによる膵頭部領域癌のリンパ経路の解明
利用荧光成像阐明胰头区域癌的淋巴通路
  • 批准号:
    24K19401
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
CO2吸着誘起蛍光により解明するリチウムケイ酸塩のCO2吸収能と表面欠陥の関係性
CO2吸附诱导荧光揭示硅酸锂CO2吸收能力与表面缺陷的关系
  • 批准号:
    24K17497
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
波長可変パルス光源を用いた分子選択的蛍光顕微法による高速・多色生体イメージング
使用可变波长脉冲光源的分子选择性荧光显微镜进行高速、多色生物成像
  • 批准号:
    24K17594
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了