自己会合によるアレスチンの活性調節機構の解明

阐明抑制蛋白活性受自缔合调节的机制

• 批准号: 15770099
• 负责人: 今元 泰
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770099/
• 关键词: G蛋白質共役型受容体; アレスチン; ロドプシン; 視覚; 情報伝達; リン酸化; トランスデューシン; X線溶液散乱

視細胞で代表的な阻害蛋白質はアレスチンである。アレスチンはリン酸化したメタロドプシンIIに結合して、その活性を停止させる。われわれはX線溶液散乱法により、生理的濃度におけるアレスチンは、濃度依存的に自己会合(単量体⇔二量体⇔四量体)することを示した。さらに、アレスチンの四量体化は極めて協同性が高く、アレスチンの総濃度が増加した場合、四量体の濃度は急峻に増えるが、単量体濃度はあまり変化しないこと、また二量体の濃度は極めて低いことがわかった。昨年度はX線溶液散乱法により求められる見掛けの分子量を指標として、アレスチンの会合状態の塩濃度依存性を調べた。その結果、生理的条件よりも高塩濃度では、二量体が安定に存在することを示した。本年度は高塩濃度で生成する二量体の溶液構造を、散乱パターンから詳しく解析した。結晶構造解析で明らかにされている四量体から任意の組み合わせで二量体を抽出し、その溶液散乱パターンを計算した。これを実験から得られた二量体の散乱パターンと比較したところ、ABサブユニット、ACサブユニットの組み合わせとは明らかに異なっていた。しかしAAサブユニット、ADサブユニット、BDサブユニットの組み合わせと比較した中では、有意な差は見られなかった。今回の解析では、Q<0.2(Å^<-1>)のデータのみが使用できたが、計算の結果、これらのサブユニットの組み合わせの散乱パターンの違いは、0.2<Q<0.3(Å^<-1>)にあらわれることがわかった。そのため、広角側をさらに精度よく測定する必要があると考えられた。

Optic cells represent the blocking protein. The activity of the enzyme was determined by the enzyme activity. This shows that due to the X-ray solution dispersion method, physiological concentrations may not change, but concentration-dependent concentrations may converge on their own (single volume two volumes four volumes). In addition, the concentration of the four substances increased rapidly, and the concentration of the two substances decreased rapidly. The concentration dependence of molecular weight index and convergence state of X-ray solution dispersion method was adjusted. The results of physiological conditions indicate that high concentrations of these two substances are stable. This year, the solution structure of two substances with high concentration was analyzed in detail. Crystal structure analysis: four components, two components, three solutions, three solutions, four solutions, The two quantities are divided into two groups: AB, AC, etc. A. A. D. D. The analysis of this loop is reversed, Q&lt;0.2(^ ) and Q&lt;<-1>0.3(^) are used. The calculation results are reversed, Q &lt;0.2 (^ ) and Q&lt;0.3(^<-1>) are used. It is necessary to test the accuracy of measurement on both sides of the board and the corner.

项目成果

Y.Imamoto: "Concentration-dependent tetramerization of bovine visual arrestin."Biophys.J.. 85. 1186-1195 (2003)

Y.Imamoto：“牛视觉抑制蛋白的浓度依赖性四聚化。”Biophys.J.. 85. 1186-1195 (2003)