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梅物の防御反応を誘導するペプチドのコンビナトリアル化学の手法による探索

使用组合化学方法寻找在李子中诱导防御反应的肽

基本信息

批准号：
15780087
负责人：
宮下正弘
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの研究において、コンビケム手法によって作製したペプチドライブラリから植物の防御反応を誘導するペプチドを効率的に探索することを目的とした、ハイスループットスクリーニング法を構築した。今年度は、新規活性ペプチドの探索を目的として、すべてランダムなアミノ酸配列を有するライブラリを作成し、スクリーニングを行なった。ライブラリの配列に含まれるアミノ酸がすべてランダム化された場合、そこに含まれるペプチドの種類は膨大なものとなる。そこで、まず4残基のランダムペプチドライブラリを作成し,スクリーニングに供した。このライブラリは、含まれる配列をすべて合成し、スクリーニングに供することができる残基数である。スクリーニングの結果、この4残基ライブラリからは、活性ペプチドは見出されなかった。その理由として、このライブラリに含まれるペプチドは短く直鎖状であるため構造が固定化されていないことが考えられた。そこで、両末端にCys残基を導入し環状化させることにより構造を固定化したライブラリを作製し、スクリーニングに供したが、このライブラリからも活性ペプチドは見出すことができなかった。これらの結果から、残基数の少なさが大きな要因であると考え、6残基の直鎖ペプチドライブラリを作製した。この場合、すべての配列の組み合わせからなる理論上のペプチドの種類すべてを網羅することは不可能であり、今回はその1%相当(約47万種類)をスクリーニングに供した。その結果、数種のペプチドがスクリーニングにおいて陽性反応を示した。しかしながら、本方法ではペプチドの配列決定を活性検出後に行なうが、これらのペプチドはいずれも構造決定に至らなかった。これらのペプチドは合成途中に副反応により修飾された可能性もあり、エドマン分解以外の方法で配列決定を行なうことが必要であると思われた。

In the past year, the research on plant defense and response was carried out in the field of plant defense and response. This year, the new activity of the exploration of the purpose of the first, second, third, fourth, fourth, In the case of a variety of products, such as a variety of products. The four residues were selected from the list of residues to be used as a starting point. The number of residues in the mixture is determined by the number of residues. The results of the four residues are as follows: The reason for this is that the structure is fixed. Cys residues at the end of the chain are introduced into the chain and the structure is immobilized. The result of this study is that the number of residues is small, and the number of residues is large. In this case, the composition of the array is theoretically impossible, but now it is equivalent to 1%(about 470,000 species). The results of several tests showed that the positive reaction was positive. The method comprises the following steps of: determining the arrangement of the active materials; determining the structure of the active materials; This is the first time that I've ever been able to do this.