慢性胆嚢炎の発癌作用:酸化ストレスによる8オキソグアニン産生と遺伝子不安定性亢進

慢性胆囊炎的致癌作用：氧化应激导致 8-氧鸟嘌呤产生和遗传不稳定性增加

• 批准号: 15790191
• 负责人: 柳澤 信之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790191/
• 关键词: 慢性胆嚢炎; 胆嚢癌; 酸化的ストレス

1.現在までの我々の解析で多くの胆嚢癌では慢性胆嚢炎-胆嚢癌連関があることがつよく示唆される。そこでこれらの現象は炎症に伴う酸化的ストレスによる粘膜障害と想定し、平成15年度はmicrosatellite instability (MSI)解析及びp16遺伝子異常の同定について下記のように検索した。胆嚢癌17症例及びその背景粘膜15例、高度な慢性胆嚢炎粘膜30例、正常胆嚢粘膜13例のホルマリン固定・パラフィン切片から目的の上皮細胞をmicrodissectionし、DNAを抽出した。対照の正常部組織はリンパ節や固有筋層を使用した。(1)microsatellite markerは2、3、4、5、17、18番染色体(計11箇所)を選択し、PCR-SSCP法にて解析した。判定方法は正常部DNAとの比較から一方のアレルに対応するバンドが消失ないし減弱している例をloss of heterozygosity(LOH)、30%(4個)以上のmarkerで正常部DNAでは認められないバンドが出現している例をMSI-high(H)、30%(3個以下)未満の例をMSI-low(L)と判定した。(2)9番染色体短腕上のp16遺伝子近傍にある5箇所のmicrosatellite markerを用いてPCR-Gene Scan法にてp16遺伝子のLOHを検索した。2.結果:(1)胆嚢癌はMSI-L:35%、MSI-H:6%で、その背景粘膜にも33%のMSI-Lがみられた。さらに高度な慢性胆嚢炎の粘膜でも既にMSIが高頻度に出現していた(MSI-L:30%)。同様にLOHも各群で確認された(胆嚢癌:35%・背景粘膜:7%、胆嚢炎:10%)(Am.J.Clin.Pathol.2003)。(2)胆嚢癌ではp16遺伝子のLOHが42%みられた。胆嚢炎は症例を追加し現在解析中である。

1. Now, we have to analyze many kinds of biliary cancer, and we have to deal with chronic cholecystitis and biliary cancer. The phenomenon of inflammation accompanied by acidification was identified by mucosal damage, microsatellite instability (MSI) analysis in Heisei 15 and abnormal p16 gene detection. 17 cases of gallbladder carcinoma, 15 cases of background mucosa, 30 cases of high grade chronic cholecystitis mucosa and 13 cases of normal gallbladder mucosa were examined by microdissection and DNA extraction. The normal part of the tissue is used for the proper reinforcement of the tissue. (1)Microsatellite marker analysis of chromosome 2, 3, 4, 5, 17 and 18 (11 chromosomes). The determination method includes: comparing the DNA of normal part with each other; determining the loss of heterozygosity(LOH), the MSI-high(H), and the MSI-low(L) of normal part DNA with each marker of 30% or more (4 markers); and determining the MSI-low(L) of normal part DNA with each marker of 30% or less (3 markers or less). (2)9 LOH detection of p16 gene was performed by PCR-Gene Scan in 5 microsatellite markers near the p16 gene on the chromosome. 2. Results:(1) MSI-L:35%, MSI-H:6%, MSI-L: 33%, MSI-L: 35%. In addition, MSI occurs frequently in the mucosa of highly chronic cholecystitis (MSI-L:30%). The same LOH was identified in all groups (biliary carcinoma:35%, background mucosa:7%, cholecystitis:10%)(Am.J.Clin.Pathol.2003). (2)The LOH of p16 gene in gallbladder cancer is 42%. Choledocholitis cases added in the analysis

项目成果

Yanagisawa N.et al.: "Microsatellite instability in chronic cholecystitis is indicative of an early stage in gallbladder carcinogenesis"American Journal of Clinical Pathology. 120(3). 413-417 (2003)

Yanagisawa N.等人：“慢性胆囊炎中的微卫星不稳定性表明胆囊癌发生的早期阶段”美国临床病理学杂志。