破骨細胞の分化特異的に発現が誘導される遺伝子の解析

破骨细胞分化中特异性诱导表达的基因分析

基本信息

项目摘要

前年度までに同定した、破骨細胞分化特異的に発現が誘導される、6個の遺伝子(OSE1〜6)について解析を行った。まず、OSE遺伝子の、カテプシンKおよびNFATc1の発現に対する影響を調べるために、これらのプロモーター解析を行った。各々のプロモーター領域について様々な長さのゲノムDNA断片をクローニングし、レポーターアッセイにより、それぞれ転写活性を有するゲノム領域を同定した。次に、コード領域が不明であったOSE6について、RT-PCRによりcDNAをクローニングし、約7kbのコード領域を同定した。データベース検索の結果、OSE6遺伝子は転写産物全長が12kb以上と見積もられる、マウスの新規遺伝子であることがわかった。OSE6遺伝子産物の予想アミノ酸配列から、OSE6は細胞運動の際のシグナル伝達に関わる分子であることが示唆された。OSE6のコード領域を発現ベクターに組込み、ヌクレオフェクションによりRAW-D細胞に導入したところ、RANKL依存的な破骨細胞分化が促進された。また、OSE6の導入により、カテプシンKプロモーターが活性化された。このことから、OSE6は前駆細胞が融合する際の細胞運動を促進することで破骨細胞分化を促進すると考えられた。一方、転写制御因子であると予想されるOSE1についても同様の解析を行ったところ、OSE1もRANKLに依存した破骨細胞分化を促進することがわかった。また、OSE1はNFATc1のプロモーター活性を上昇させた。これらの結果から、転写因子であると予想されるOSE1はNFATc1の発現誘導を介して破骨細胞分化を促進していることが示唆された。
Before the annual ま で に with fixed し た, osteoclast differentiation specific に 発 now が induced さ れ る, 6 の heritage 伝 child (OSE1 ~ 6) に つ い analytical line を っ て た. ま ず, OSE heritage 伝 の, カ テ プ シ ン K お よ び NFATc1 の 発 now に す seaborne る influence を adjustable べ る た め に, こ れ ら の プ ロ モ ー タ ー parsing line を っ た. Each 々 の プ ロ モ ー タ ー field に つ い て others 々 な long さ の ゲ ノ ム DNA fragment を ク ロ ー ニ ン グ し, レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ に よ り, そ れ ぞ れ planning write activity を す る ゲ ノ を ム field with constant し た. に, コ ー ド field が unknown で あ っ た OSE6 に つ い て, rt-pcr に よ り cDNA を ク ロ ー ニ ン グ し, about 7 KB の コ ー を ド field with constant し た. デ ー タ ベ ー ス 検 cable の results, OSE6 but 伝 は planning to write a product total length of more than 12 KB が と see product も ら れ る, マ ウ ス の new rules but 伝 son で あ る こ と が わ か っ た. OSE6 heritage 伝 zi chan content の to think ア ミ ノ acid with column か ら, OSE6 は cell movement の interstate の シ グ ナ ル 伝 da に masato わ る molecular で あ る こ と が in stopping さ れ た. OSE6 の コ ー ド field を 発 now ベ ク タ ー に group 込 み, ヌ ク レ オ フ ェ ク シ ョ ン に よ り RAW - D cells に import し た と こ ろ, RANKL dependent な osteoclast differentiation が promote さ れ た. Youdaoplaceholder0, OSE6 <s:1> import によ によ, カテプシ が Kプロモ タ タ が が to activate された. Before こ の こ と か ら, OSE6 は が 駆 cell fusion す る interstate の cell movement を promote す る こ と で osteoclast differentiation を promote す る と exam え ら れ た. A party, planning to write suppression factor で あ る と to think さ れ る OSE1 に つ い て も with others in line analytical を の っ た と こ ろ, OSE1 も RANKL に dependent し た osteoclast differentiation を promote す る こ と が わ か っ た. The activities of また, OSE1 プロモ, NFATc1 プロモ, プロモ, タ and を increase させた. こ れ ら の results か ら, planning to write factor で あ る と to think さ れ る OSE1 は NFATc1 の 発 now induced を interface し て osteoclast differentiation を promote し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

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Rahman MM.: "Two histone deacetylase inhibitors, trichostatin A and sodium butyrate, suppress differentiation into osteoclasts but not into macrophages."Blood. 101巻19号. 3451-3459 (2003)
Rahman MM.:“两种组蛋白脱乙酰酶抑制剂,曲古抑菌素 A 和丁酸钠,抑制分化为破骨细胞,但不抑制分化为巨噬细胞。”《Blood》,第 101 卷,第 19 期。3451-3459 (2003)
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