運動ニューロン分化にともなう遺伝子発現解析

与运动神经元分化相关的基因表达分析

• 批准号: 07279234
• 负责人: 田中 英明
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279234/
• 关键词: 運動ニューロン; ニワトリ胚骨髄; Differential Display; cDNAクローニング; in situハイブリダイゼーション

運動ニューロンは、発生直後から、標的筋へ到達する軸索成長、シナプスの形成、細胞死、上位中枢からのシナプス形成といった脳神経系の発生において重要なイベントを経て回路形成を完成させることが詳しく解析されてきたが、これらの過程に重要な役割を担う分子の多くは未知である。今年度は、運動ニューロンの軸索が肢基部の神経叢に伸長する4日目胚(E4)脊髄全体や特異抗体を用いたパンニング法により精製した運動ニューロンのmRNAについてDifferential Display法を行ない、34個のcDNAバンドを回収し、シークエンスしたところ、Gluリセプターなど既知分子も含まれていたが、in situハイブリダイゼーションによる二次スクリーニングの結果、運動ニューロンに特異的に発現する未知の分子として4つの分子を同定した。そのうちクローン30-3はE3から運動ニューロンで発現が見られ、E5くらいから神経管全体に発現が広がる。後根神経節、脳でも発現し4kのcDNAクローンを得ている。クローン49-7はE4、E5の運動ニューロン全体に薄く発現する。クローン37-4は5.5kの全長のcDNAクローンであり、E4から腰部運動ニューロンにのみ発現が見い出され、膜蛋白分子と考えられる。

Movement ニューロンは, 発生真后から, target muscle へreaches するaxonal growth, シナプスの formation, cell death, upper central からのシナプス formation and といった脳神経system の発生においてImportantなイベントを経てLoop formationをCompleteさせることがDetailedしくanalyticされてきたが, これらのprocessにimportantなservice cutを偆moleculesの多くはunknownである. This year, the specific antibody for the whole body of the spinal cord of the 4 day embryo (E4) of the movement of the axonal axis of the limb base is elongated.いたパンニング法によりRefinedしたmotionニューロンのmRNAについてDifferential Display method を行ない, 34 cDNA バンドを recovery し, シークエンスしたところ、Gluリセプターなどknown molecular も汉まれていたが、in Situation results, movementニューロンにSpecial に発appearsするUnknownのmoleculeとして4つのmoleculeを同定した.そのうちクローン30-3はE3 から Sports ニューロンで発appears が见られ, E5 くらいから神経管全 に発appears が広がる. Gogengami 経节, 脳でも発appears 4kのcDNAクローンを得ている.クローン49-7はE4, E5の体育ニューロンall are thin and clear.クローン37-4は5.5kのfull-length cDNAクローンであり、E4らWaist movement ニューロンにのみ発 appear が见い出され, membrane protein molecules と考えられる.

项目成果

Ohta Kunimasa: "The receptor tyrosine kinase,Cek8,is transiently expressed on subtypes of motoneurons in the spinal cord during development" Mechanisms of Development. 54. 59-69 (1996)

Ohta Kunimasa：“受体酪氨酸激酶 Cek8 在发育过程中在脊髓运动神经元亚型上短暂表达”发育机制。

Nakamura,Masaaki: "Developmental and denervation changes in c-ret proto-oncogene expression in the chick motoneurons" Molecular Brain Research. (in press). (1996)

Nakamura，Masaaki：“小鸡运动神经元中 c-ret 原癌基因表达的发育和去神经变化”分子脑研究。

Fukushima Mikiko: "Regional specification of motoneurons along the anterior-posterior axis is independent of the notochord" Development. in press (1996)

福岛干子：“沿前后轴的运动神经元的区域规范独立于脊索”发展。

Mettling Clement: "Survival of newly postmitotic motoneurons is transiently independent of exogenous trophic support" The Journal of Neuroscience. 15. 3128-3137 (1995)

梅特林·克莱门特（Mettling Clement）：“新有丝分裂后运动神经元的存活暂时独立于外源营养支持”《神经科学杂志》。