新しい神経内分泌因子、ウロコルチンによる副腎皮質と髄質の相互作用の解明

通过新的神经内分泌因子尿皮质素阐明肾上腺皮质和髓质之间的相互作用

• 批准号: 15790481
• 负责人: 斉藤 隆俊
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790481/
• 关键词: ウロコルチン; 副腎皮質細胞; H295R細胞; コルチコトロピン放出ホルモン受容体; 共培養

我々は新しい神経内分泌因子、ウロコルチンを介した副腎皮質と髄質の相互作崩を明らかにするために下記の実験を行った。まず牛副腎より単離した副腎皮質細胞を培養し、total RNAを回収した。さらにヒト副腎腺癌のセルラインであるH295R細胞からもtotal RNAを回収し、実験に用いた。既にコルチコトロピン放出ホルモン受容体(CRH-R)の発現が確認できるとのコンセンサスが得られているプライマーを用いて、RT-PCRを施行した。しかしながら様々な条件で検討したが、発現を確認することはできなかった。さらに我々は独自にプライマーを設定し同様な実験を行ったが、発現を確認することはできなかった。一方、同様のtotal RNAを用いて、GAPDHのRT-PCRを施行したところ、発現を確認することができた。また手術検体より回収したヒト下垂体のtotal RNAにおいては、上記のプライマーを用いてRT-PCRを施行したところ、発現を確認することができた。以上の結果より、以前の報告と異なる結果であるが、我々の用いた実験系では副腎におけるCRH-Rの発現は確認できなかった。現在は培養条件によって蛋白の発現が異なる可能性を考慮し、H295R細胞の血清濃度や細胞密度、培養液等の条件を変化させ、CRH-Rの発現の可能性を探している。培養系に持ち込む際の物理的な刺激の影響を考慮し、副腎を臓器の状態からtotal RNAを回収して同様の検討を行う。またオートクリン・パラクリンの因子やホルモンの影響を考慮し、副腎髄質細胞との共培養系で、CRH-Rの発現を検討することを考えている。さらにCRH-Rの他のサブタイプの発現の可能性も考慮し、新たなプライマーを設定し、発現を確認する予定である。

The endocrine factors in the kidney and the adrenal cortex interact with each other. The total RNA in the cortex of the kidney was recovered. H295R cells were isolated from pararenal adenocarcinoma cells and used in vitro. The detection of CRH-R was confirmed by RT-PCR. The conditions are discussed and confirmed. I'm going to set it up and confirm it. The total RNA of one party and the same party were used in the RT-PCR of GAPDH. The total RNA of the pituitary gland was detected by RT-PCR. The above results are different from those reported in previous reports. The possibility of CRH-R expression was investigated by changing culture conditions, serum concentration, cell density and culture medium of H295R cells. The effects of physical stimuli on the culture system were considered, and the status of accessory kidney organs, total RNA, and the like were discussed. To consider the influence of factors on CRH-R expression, to investigate the development of CRH-R in the co-culture system of pararenal cytoplasmic cells The possibility of CRH-R's occurrence is considered, the new occurrence is set, and the occurrence is confirmed.

项目成果

Saito T et al.: "A case of acquired deficiency of pituitary GH, PRL and TSH associated with type 1 diabetes mellitus"Endocrine J. (In press). (2004)

Saito T 等人：“与 1 型糖尿病相关的垂体 GH、PRL 和 TSH 获得性缺乏的病例”End​​ocrine J.（出版中）。

Saito T et al.: "Microscopic polyangiitis associated with marked systemic bleeding tendency caused by disseminated intravascular coagulation"Intern Med. 42(9). 850-855 (2003)

Saito T 等人：“与弥散性血管内凝血引起的显着全身出血倾向相关的显微镜下多血管炎”Intern Med。