造血幹細胞の未分化性維持と分化におけるインターロイキン3レセプター発現の意義

IL-3受体表达在造血干细胞未分化状态维持及分化中的意义

基本信息

  • 批准号:
    15790525
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.24万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.マウス造血幹細胞の分離および培養、移植C57BL/6-Ly5.1マウス由来の骨髄単核細胞から直接CD34陽性細胞を、あるいは分化抗原陰性細胞(Lin-)を得た後にCD34,Sca-1,c-kitの各蛍光抗体で染色し、セルソーターでCD34陰性(正常骨髄)あるいはCD34陽性(5-FU処理後骨髄)c-kit陽性Sca-1陽性分化抗原陰性(KSL)細胞を分離した。SCF/IL-11±IL-3の存在下で3-7日間培養し、致死量放射線照射C57BL/6-Ly5.2マウスに上記培養細胞を移植した。2.移植マウスの末梢血を用いた生着率の解析結果移植後2、4,6ヶ月のマウス末梢血でドナー由来細胞の比率を解析した。正常マウス由来定常期CD34陰性KSL細胞の短期間(3日間)培養では、IL-3添加群と非添加群では生着率に差違を認めなかったが、7日間培養ではIL-3添加群は非添加群に比べて有意に生着率が低かった。また5-FU投与後に得たCD34陽性KSL細胞では、3日間培養でもIL-3添加群は有意に低い生着率を示した。さらにマウス骨髄単核球から直接得たCD34陽性細胞による実験でも、5-FU同様に3日間培養でIL-3添加群は有意に低い生着率を示した。いずれも血清添加・無血清の培養条件で同様の結果を示し、IL-3Rは静止期よりもcyclingしている骨髄幹細胞でより機能すると推測された。4.IL-3Rの発現解析SCF/IL-11を加えた培養後の細胞表面IL-3Rの発現比較を行なった。フローサイトメトリーでは7日間培養後には3日後に比べて発現は高い傾向を示したが、有意な差は得られなかった。mRNA発現解析では、分離直後、3日間後、7日後とIL-3Rの発現は高くなる傾向を予想したが、安定した結果は示せなかった。PCR条件のさらなる改善が今後の課題である。
1. マ ウ ス hematopoietic stem cell separation の お よ び cultivation, transplant C57BL / 6 - Ly5.1 マ ウ ス origin の bone marrow nuclear cells 単 か ら を CD34 positive cells directly, あ る い は differentiation antigen negative cells (Lin) を た に after CD34, Sca - 1, c - kit の 蛍 light each antibody で dyeing し, セ ル ソ ー タ ー で CD3 4-negative (normal bone marrow)ある CD34 positive (5-FU treated bone marrow)c-kit positive, Sca-1 positive, differentiation antigen-negative (KSL) cells を isolation た. In the presence of SCF/IL-11±IL-3 <s:1>, で3-7 days of daily culture <s:1>, lethal dose radiation exposure to C57BL/6-Ly5.2 ウスに superscribed culture cells を transplantation <s:1> た. 2. Transplant マ ウ ス を の peripheral blood with い た の analytic results with rate after transplantation on 2, 4, 6 ヶ の マ ウ で ス peripheral blood ド ナ ー origin cells の ratio を parsing し た. Normal マ ウ ス origin stationary phase of CD34 negative の KSL cells (3 day) during a short training で は group, IL - 3 add と not add で は violations を to recognize the rate に are poor め な か っ た が, 7 day training で は IL - 3 add group は not add group に than べ て intentionally に with rate が low か っ た. After administration of また5-FU, に た CD34-positive KSL cells で and 3-day culture of で <s:1> IL-3 addition population に intentionally に low <s:1> growth rate を indicated that た た さ ら に マ ウ ス bone marrow 単 nuclear ball か ら direct た CD34 positive cells に よ る be 験 で も, 5 - FU with others in 3 day training で に IL - 3 add group of low は intentionally に い を with rate in し た. い ず れ も added, without serum の culture conditions で with others の results を し, IL - 3 r は telogen よ り も cycling し て い る bone marrow stem cells で よ り function す る と speculation さ れ た. 4. Analysis of IL-3R Development: Comparison of IL-3R development on the surface of <s:1> cells after SCF/IL-11を + えた culture: を rows なった. フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー で は 7 day after incubation に は 3 に later than べ て 発 は high い tendency now を shown し た が, poor deliberately な は ら れ な か っ た. MRNA 発 now parse で は, straight after the separation, 3, and 7 days after the day と IL - 3 r の 発 now は high く な る tendency を to think し た が, stable し は た results shown せ な か っ た. PCR conditions さらなる improvement が future <s:1> topics である.

项目成果

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科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Dysregulation of granulocyte, erythrocyte, and NK cell lineages in Fli-1
Fli-1 中粒细胞、红细胞和 NK 细胞谱系的失调
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Masuya M;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
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    滝田 順子
幼弱T細胞性急性リンパ性白血病の予後因子の検討
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  • 发表时间:
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  • 作者:
    木村 俊介;関 正史;吉田 健一;上野 浩生;大木 健太郎;小林 良二;出口 隆生;橋井 佳子;今村 俊彦;佐藤 篤;清河 信敬;小林 正夫;岡 明;林 泰秀;真部 淳;小原 明;堀部 敬三;宮野 悟;小川 誠司;滝田 順子
  • 通讯作者:
    滝田 順子

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