ガングリオシドGD1aによるインターロイキン-3情報伝達調節機構の解明

阐明神经节苷脂GD1a对白细胞介素3信号转导的调节机制

• 批准号: 06670173
• 负责人: 中村 充
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670173/
• 关键词: インターロイキン-3; サイトカイン; 白血病細胞株; ガングリオシド; 情報伝達

我々は、インターロイキン-3(IL-3)遺伝子を導入することによって自律性増殖能を獲得したマウス骨髄性白血病細胞株NFS60の解析から、ガングリオシドGD1aがIL-3による情報伝達を促進的に調節していることを見いだした。これは、がん関連糖脂質が単にがん細胞表面のフェノルタイプを定めているのではなく、細胞増殖機構およびがん細胞の自律性増殖に積極的に関与していることを示している。これに基づき、本研究ではCD1aの発現調節機構の解析を行った。まず、メタロチオネインプロモーターやサイトメガロウイスルプロモーターでIL-3遺伝子をドライブし、遺伝子導入後にネオマイシン耐性形質でセレクションできるようにプラスミドを組み換えて調製した。遺伝子をNFS60細胞に導入後、導入株をG418で選択した。その導入株におけるガングリオシドGD1aの発現、並びにIL-3依存性株における外来性IL-3のGD1a発現に対する効果を解析した。その結果、ガングリオシドGD1aは細胞がIL-3非依存性を獲得するか否か、また外来性IL-3が細胞増殖をサポートするか否かという点で、全か無かの割合で発現することが判明した。NFS60細胞のIL3自己分泌という観点からすると、内在性に遺伝子強発現させることにより生成したIL-3蛋白は正常なレセプターを介さない経路で、細胞内で細胞増殖に作用していることがわかっている。外来性にIL-3を作用させてもガングリオシドGD1aが発現するのは正常なIL-3レセプターを介するものであるのに対し、内在性にIL-3遺伝子を強発現させて見いだされるガングリオシドGD1aは正常なレセプターを介さないIL-3の作用によるものであることが示唆された。

We found that the expression of IL-3 gene in GD-1a cells was regulated by the expression of IL-3 gene in GD-1a cells, and the expression of IL-3 gene was regulated by the expression of IL-3 gene in GD-1a cells. The relationship between sugar and lipid is closely related to the cell surface and the cell growth mechanism. This study aims to analyze the mechanism of CD1a development and regulation. The IL-3 gene is introduced into the cell, and the resistance of the IL-3 gene is changed after the gene is introduced into the cell. After the introduction of NFS60 cells, the introduced strain G418 was selected. Analysis of the effects of exogenous IL-3 and GD-1a on the development of introduced plants and IL-3-dependent plants The results indicate that GD1a is cell independent of IL-3, and exogenous IL-3 is cell dependent. IL-3 self-secretion in NFS60 cells, intrinsic gene expression, production of IL-3 protein, normal pathway, intracellular role in cell proliferation. Exogenous IL-3 acts as a mediator for normal IL-3 expression, whereas intrinsic IL-3 is strongly expressed as a mediator for normal IL-3 expression.

项目成果

M.Nakamura: "細胞分化から見た糖脂質研究の進歩" 臨床化学. 23. 132-144 (1994)

M. Nakamura：“从细胞分化的角度进行糖脂研究的进展”《临床化学》23. 132-144 (1994)。

A.Tsunoda,M.Nakamura et al.: "IL-3-associated Expression of Ganglioside GD1a in Mouse Myelogenous Lautemia NFS60 Cells Introduced with IL-3 Gene." Biochemistry. (in press). (1995)

A.Tsunoda、M.Nakamura 等人：“引入 IL-3 基因的小鼠骨髓性劳特血症 NFS60 细胞中神经节苷脂 GD1a 的 IL-3 相关表达”。