顎関節滑液中の細胞を用いた顎関節破壊の分子生物学的解析

利用颞下颌关节滑液中的细胞对颞下颌关节破坏进行分子生物学分析

基本信息

批准号：
15791181
负责人：
高野裕史
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791181/
关键词：
顎関節滑液破骨細胞滑膜関節破壊分子生物学

项目摘要

1)顎関節より採取された滑液中細胞の単離、培養に成功し、これらの細胞から骨吸収能を有する破骨細胞の誘導系を確立した。これらの細胞をビタミンD3やPGE2の刺激下で培養することによりTRAP陽性の多核巨細胞が形成され、象牙切片上の培養では吸収が認められた(走査電顕にて確認)。また、この滑液中細胞から培養にて増殖する線維芽細胞様細胞を継代培養し、その表現形を同定。ヒト線維芽細胞マーカー、ビメンチン陽性、マクロファージ、樹状細胞マーカー陰性であり、滑膜由来の線維芽細胞である可能性が示唆された。これらの細胞と健常人末梢血単球との共培養でも破骨細胞を誘導し、滑液中線維芽細胞様細胞の破骨細胞分化支持能が証明された。これにより、顎関節滑液中には破骨細胞前駆細胞、破骨細胞形成支持細胞の存在が明らかとなり、顎関節症における関節破壊、変形などの病態形成に大きく関与していることが示唆された。(以上論文投稿中)2)顎関節症患者の関節滑膜を採取、培養し、それらの細胞の表現形を同定した。これらの細胞は、ヒト線維芽細胞マーカー、ビメンチン陽性、マクロファージ、樹状細胞マーカー陰性であり、滑膜由来の培養線維芽細胞であることを確認した。また、これらの細胞も健常人末梢血単球との共培養で象牙切片の吸収能を有する破骨細胞を誘導し、顎関節滑膜細胞の破骨細胞分化支持能を証明した。以上のことより、顎関節内では破骨細胞前駆細胞、破骨細胞形成支持細胞が存在し、病状の変化による液性因子等の相互作用から顎関節疾患における骨変形や病態形成に関与していることが示唆された。

1）成功分离并培养了从颞下颌关节收集的滑液中的细胞，并从这些细胞中建立了具有骨吸收能力的破骨细胞的诱导系统。在刺激维生素D3或PGE2的刺激下培养这些细胞以形成陷阱阳性的多核巨细胞，并在象牙切片的培养中观察到吸收（通过扫描电子显微镜证实）。另外，从滑液中的细胞中培养了在培养中生长的成纤维细胞样细胞，并鉴定出其表型。它是人类成纤维细胞标记，波形蛋白阳性，巨噬细胞和树突状细胞标记物阴性，这表明它可能是滑膜衍生的成纤维细胞。这些细胞与健康个体的外周血单核细胞的共培养也诱导了破骨细胞，并证明了成纤维细胞样细胞支持滑液中破骨细胞分化的能力。这揭示了颞下颌关节滑液中的破骨细胞前体细胞和破骨细胞形成的支撑细胞，这表明它们与颞下颌关节疾病中关节破坏的形成和畸形很大。（在文章提交中）2）收集并培养颞下颌关节疾病的患者的滑膜，以鉴定这些细胞的表型。这些细胞是人的成纤维细胞标记物，波形蛋白阳性，巨噬细胞，树突状细胞标记为阴性，并被证实是源自滑膜的成纤维细胞。此外，这些细胞还通过与健康的外周血单核细胞共培养，诱导了象牙切片的破骨细胞，证明了支持颞下颌关节滑膜的破骨细胞分化的能力。从以上，已经提出，颞下颌关节内存在破骨细胞前体细胞和破骨细胞形成的支撑细胞，并且由于疾病的变化而与体液因子的相互作用表明它们参与了颞下颌骨关节疾病中的骨变形和病理形成。