ヒト骨髄腫細胞の増殖シグナルに関する研究

人骨髓瘤细胞增殖信号的研究

基本信息

批准号：
04F04500
负责人：
河野道生
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04500/
关键词：
骨髄腫細胞 SDF-1 Galectin-1 IL-6 CD45 CD45RA CD45R0 骨髄腫 NF-kB CXCR4

项目摘要

ヒト骨髄腫細胞のin vitro増殖系の確立を目指した。骨髄ストローマ細胞から特異的に産生される分子の中で、SRF-1とGalectin-1に注目した。まず、SDF-1受容体(CXCR4)の骨髄腫細胞における発現をフローサイトメーターで解析した。骨髄腫細胞はCXCR4を発現していたが、成熟型骨髄腫細胞で強く発現していた。実際に、患者骨髄腫細胞にSDF-1とGalectin-1を添加してin vitro培養すると、確かにその生存は維持された。未熟型骨髄腫細胞では、IL-6を更に添加することで、その生存が維持された。更に、Galectin-1の生存・増殖の維持作用は、細胞膜上のCD45アイソフォームの発現有無により規定されていた。すなわち、CD45RA発現しているB細胞株等では、Galectin-1はその生存・増殖を強く抑制した。逆に、CD45RO発現あるいはCD45陰性の骨髄腫細胞ではその生存・増殖は維持された。細胞内シグナル伝達を解析すると、CD45RA発現細胞ではGalectin-1投与によりMAPK活性が抑制されることが明らかとなった。以上、本年度の研究成果により、ヒト患者骨髄腫細胞をin vitro培養維持するにはSDF-1とGalectin-1の添加が極めて有効であることが明らかになった。特に、Galectin-1はCD45アイソフォームの発現により作用が全く異なることがわかり、骨髄単核球分画を培養材料に使用する場合、Galectin-1添加は骨髄腫細胞の生存・増殖の維持に極めて好都合であることが明らかとなった。今後、このin vitro培養系を用いることで、ヒト骨髄腫細胞の生存・増殖の機構が更に明らかにできると考えられる。

我们旨在为人骨髓瘤细胞建立体外增殖系统。在由骨髓基质细胞专门产生的分子中，我们专注于SRF-1和Galectin-1。首先，通过流式细胞仪分析骨髓瘤细胞中SDF-1受体（CXCR4）的表达。骨髓瘤细胞表达CXCR4，但在成熟的骨髓瘤细胞中强烈表达。实际上，当用SDF-1和添加Galectin-1在体外培养患者骨髓瘤细胞时，它的存活肯定得到了维持。在未成熟的骨髓瘤细胞中，进一步添加IL-6来维持其存活。此外，通过在细胞膜上的CD45同工型存在或不存在CD45同工型，确定了Galectin-1的生存和增殖效应。也就是说，在B细胞系等表达CD45RA中，半乳糖素1强烈抑制其存活和增殖。相反，它的存活率和增殖保持在CD45RO表达或CD45阴性骨髓瘤细胞中。细胞内信号传导的分析表明，Galectin-1给药抑制了表达CD45RA的细胞中的MAPK活性。今年的上述结果表明，添加SDF-1和Galectin-1在人类患者的体外培养中保持骨髓瘤细胞极为有效。特别是，发现Galectin-1由于CD45同工型的表达而具有完全不同的作用，并且在使用单核细胞部分作为培养物材料时，发现Galectin-1添加对于维持骨髓瘤细胞的生存和增殖非常有利。人们认为，使用这种体外培养系统将进一步阐明人骨髓瘤细胞生存和增殖的机制。