前癌病変良性M蛋白血症から骨髄腫への進展に関する分子疫学的研究

癌前良性M蛋白血症向骨髓瘤进展的分子流行病学研究

基本信息

批准号：
14031215
负责人：
河野道生
金额：
$ 3.07万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14031215/
关键词：
骨髄腫骨髄腫細胞未熟型骨髄腫細胞 MGUS 遺伝子プロファイリング IL-6

项目摘要

本研究は、BMGから骨髄腫へ進展するのを早期に検出できる指標を明らかにするとともに、その進展の機序を遺伝子発現プロファイリング等の手法から検討した。BMG患者50例および骨髄腫患者50例につき、informed consentを得た後骨髄穿刺を行い、骨髄穿刺液を採取した。形質細胞亜群の解析結果は、BMGのままで安定している症例40例では骨髄中の単クローン性形質細胞の増加はなく中間型あるいは成熟型形質細胞が主体であり、未熟型形質細胞は少なかった。一方、BMGから骨髄腫への進展をうかがわせた10症例では、骨髄中の単クローン性形質細胞(CD19-)の増加があり、その中で未熟型形質細胞が増加していた。未熟型形質細胞のさらにCD45+(MPC-1-CD49e-)細胞の増加が見られた。一部の症例では、セル・ソーターで形質細胞亜群(未熟型(MPC-1-)、中間型および成熟型(MPC-1+))を分取した後、それぞれの細胞分画からRNAを抽出した。また、骨髄腫細胞株ILKM2,ILKM3を使用して、増殖因子IL-6で刺激前、刺激後3時間の細胞を回収してRNAを抽出し、常法のごとくCy3あるいはCy5でラベルした後、Atlas^<TM> Glass Human 7.6(Clontech)のスライドガラスを用い、遺伝子発現プロファイリングを解析した。IL-6で増殖刺激した後の遺伝子発現では、12種類の遺伝子が発現上昇し、逆に54種類の遺伝子発現が有意に減少した。以上、骨髄腫細胞株を使用した遺伝子プロファイリングの検討を行った結果からは、増殖因子IL-6に応答して発現が増加する遺伝子が明らかになった。未熟型形質細胞のIL-6による増殖反応の機序を考える上で極めて重要な情報を得ることができた。一方で、BMGと骨髄腫とで未熟型骨髄腫細胞に遺伝子発現に大きな相違はないことは、未熟型形質細胞そのものの分子細胞生物学的研究をさらに進める必要がある。

这项研究揭示了可以检测早期从BMG到骨髓瘤的早期进展，并使用基因表达分析等方法检查了进展的机理。在50名BMG患者和50例骨髓瘤患者中，获得知情同意后进行了骨髓抽吸，并收集了骨髓抽吸。血浆细胞亚组的分析结果表明，在40例与BMG保持稳定的情况下，骨髓中的单克隆血浆细胞没有增加，而是中间或成熟的血浆细胞，而且未成熟的血浆细胞很少。另一方面，在10例显示从BMG到骨髓瘤进展的情况下，骨髓中的单克隆等离子体细胞（CD19-）增加，其中未成熟的血浆细胞数量增加。观察到未成熟浆细胞中CD45+（MPC-1-CD49E-）细胞的额外增加。在某些情况下，浆细胞亚组（未成熟（MPC-1-），中间和成熟（MPC-1+））通过细胞分离剂分离，并从每个细胞分数中提取RNA。此外，使用骨髓瘤细胞系ILKM2和ILKM3，在用生长因子IL-6刺激之前和之后收集细胞3小时，然后提取RNA，并像往常一样用Cy3或Cy5标记，然后使用Atlas^<tm> Glass Humantheme的玻璃玻璃玻璃玻璃仪进行分析，然后分析基因表达分析。在用IL-6增殖刺激后的基因表达中，增加了12种类型的基因，相反，54种基因表达显着降低。上述对基因分析的研究结果使用骨髓瘤细胞系显示了一个基因，其表达对生长因子IL-6的反应增加。我们在考虑未成熟浆细胞中IL-6引起的增生反应的机制方面获得了极为重要的信息。另一方面，BMG和骨髓瘤之间未成熟的骨髓瘤细胞之间的基因表达没有显着差异，这需要在未成熟浆细胞本身的分子细胞生物学研究中进一步进步。