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魚類の免疫機構に関与するサイトカイン、特にTNFおよびFasリガンドの機能解析

鱼类免疫系统相关细胞因子的功能分析，特别是TNF和Fas配体

基本信息

批准号：
04J12153
负责人：
黒部智史
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、TNFおよびFasの細胞内情報伝達およびアポトーシス誘導に関与するカスパーゼ10遺伝子のクローン化を行なうと共にカスパーゼ10遺伝子発現プラスミドをヒラメ培養細胞へ導入し機能解析を行なった。クローン化したヒラメカスパーゼ10のcDNAは、全長2,282bpで、495アミノ酸残基をコードしていた。ヒラメカスパーゼ10は、2か所のDeath effector domain (DED)ホモロジー領域、LargeサブユニットおよびSmallサブユニットにより構成されていた。ヒラメカスパーゼ10の推定アミノ酸配列は、ヒトカスパーゼ10と全長配列で32.6%、Smallサブユニットで59.8%の相同性を示した。カスパーゼ10遺伝子は、ヒラメの14種類の臓器(脳、眼球、頭腎、心臓、腸、肝臓、筋肉、卵巣、白血球、表皮、脾臓、胃、後腎)の内、鰓、白血球、脾臓および後腎で強い発現を示した。その他にも、頭腎、心臓、腸、表皮および胃において発現がみられた。ヒラメカスパーゼ10のcDNAを真核生物発現用ベクター(pCI-neo vector)に組込んだ。構築した発現プラスミドをトランスフェクション法によりヒラメ胚由来の培養細胞(HINAE)に導入したところ、アポトーシス誘導能が認められた。これらのことより、ヒラメのカスパーゼ10はほ乳類のものと類似のアポトーシス誘導能を有していることが示唆された。

This year, we will continue to analyze the function of TNF-and Fas in cell culture, including the expression and induction of TNF-and Fas genes. The full length of the cDNA is 2,282 bp and the amino acid residue is 495 bp. The Death effector domain (DED) of the 10-and 2- The similarity of the estimated acid alignment of the 10-bit sample was 32.6%, and that of the estimated acid alignment of the 10-bit sample was 59.8%. 14 kinds of organs (eye, head and kidney, heart, intestine, liver, muscle, egg, white blood cell, epidermis, spleen, stomach and hind kidney) were found in the liver, gills, white blood cell and spleen. The heart, intestine, epidermis, and stomach are the most common organs in the body. Eukaryotic development of cDNA from pCI-neo vector Construction of a new method for the induction of embryonic origin in cultured cells (HINAE) This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with someone else.