Identification of the binding domain of Plasmodium falciparum erythrocyte binding protein.

恶性疟原虫红细胞结合蛋白结合域的鉴定。

基本信息

批准号：
16390126
负责人：
TORII Motomi
金额：
$ 9.66万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

Invasive form of Plasmodium falciparum malaria parasite possesses microorganelle, called Rhoptry, at its apex, from which erythrocyte binding protein RhopH complex (comprising RhopH1, RhopH2, and RhopH3) is discharged and considered to have essential role, because of the failure of attempt to disrupt gene locus. We showed that this complex binds erythrocyte surface via protein and GPI-anchor dependent manner, but the precise mechanism is still unknown. Thus, in this project, we generated genetically manipulated Plasmodium falciparum, which express a part of RhopH complex fused with GFP and asked if each chimeric protein have erythrocyte binding ability. To this end, we generated 4 parasite lines possessing plasmids which would express 1/3 of RhopH1, 2/3 of RhopH1, full length of RhopH1 fused with GFP, or GFP alone under the rhoptry protein promoter. However, we could observe GFP signal only from parasite for 1/3 of RhopH1 and GFP only. The reason why GFP signal is not detected from parasites with 2/3 or full length of RhopH1 is unknown, but we speculate that this maybe because of the relatively large plasmid size. Interestingly, parasite expressing GFP fused with only signal peptide of the RhopH2 showed rhoptry localization of GFP. This indicates that the default destination of the protein with signal peptide could be rhoptry among multipel microorganelle. Immunoprecipitation against RhopH2 did not co-purify 1/3 of RhopH1 plus GFP, indicating this part is not responsible for the RhopH complex formation. Also, we could not observe erythrocyte binding ability for this 1/3 of RhopH1 chimeric protein, suggesting that this region may not be the binding domain.

恶性疟原虫寄生虫的侵入性形式具有微型连接，称为Rhoptry，在其顶端，从中，红细胞结合蛋白Rhoph复合物（包含Rhoph1，Rhoph2和Rhoph3）被排出并被认为具有重要作用，因为试图破坏Gene locus的尝试失败。我们表明，这种复合物通过蛋白质和GPI锚定方式结合红细胞表面，但精确的机制仍然未知。因此，在这个项目中，我们产生了遗传操纵的恶性疟原虫，该疟原虫表达了与GFP融合的一部分，并询问每个嵌合蛋白是否具有红细胞结合能力。为此，我们产生了4个具有质粒的寄生虫线，这些寄生虫将表达1/3的Rhoph1、2/3的Rhoph1，与GFP融合的全长Rhoph1或Rhoptry蛋白启动子下的GFP。但是，我们只能从寄生虫中观察到GFP信号，仅对1/3的Rhoph1和GFP。从2/3或全长rhoph1中未从寄生虫中检测到GFP信号的原因是未知的，但我们推测这可能是因为相对较大的质粒大小。有趣的是，表达GFP的寄生虫仅与Rhoph2的信号肽融合在一起显示GFP的Rhoptry定位。这表明具有信号肽的蛋白质的默认目的地可能是多物种微有连续性中的Rhoptry。针对Rhoph2的免疫沉淀不能使Rhoph1和GFP的1/3共纯化，这表明该部分对Rhoph络合物的形成概不负责。同样，我们无法观察到这种1/3的Rhoph1嵌合蛋白的红细胞结合能力，这表明该区域可能不是结合结构域。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Erythrocyte surface glycosylphosphatidyl inositol anchored receptor for the malaria parasite

DOI：
10.1016/j.molbiopara.2004.11.017
发表时间：
2005-03-01
期刊：
MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY
影响因子：
1.5
作者：
Rungruang, T;Kaneko, O;Torii, M
通讯作者：
Torii, M

The Plasmodium falciparum clag 9 gene encodes a rhoptry protein.

恶性疟原虫 clag 9 基因编码一种菱形蛋白。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Mol Microb 52(1)
影响因子：
0
作者：
Ishii T.;Yasuda K.;Akatsuka A.;Hino O.;Hartman P.S.;Ishii N.;Kaneko O et al.;Winter G et al.;Hino O.;Arakawa T et al.;Rungruang T et al.;Ling IT et al.
通讯作者：
Ling IT et al.

Nasal immunization with a malaria transmission-blocking vaccine candidate Pfs25 induces complete protective immunity in mice against field-isolated Plasmodium falciparum

使用阻断疟疾传播的候选疫苗 Pfs25 进行鼻免疫可诱导小鼠针对现场隔离的恶性疟原虫产生完全保护性免疫力

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Infection and Immunity 73
影响因子：
0
作者：
Arakawa T;et. al.
通讯作者：
et. al.

Apical expression of three RhopH1/Clag proteins as components of the Plasmodium falciparum RhopH complex

DOI：
10.1016/j.molbiopara.2005.05.003
发表时间：
2005-09-01
期刊：
MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY
影响因子：
1.5
作者：
Kaneko, O;Lim, BYSY;Torii, M
通讯作者：
Torii, M

Plasmoduim ookinate-secreted proteins secreted through a common micronemal pathway are targets of blocking malaria transmission.

通过共同的微线体途径分泌的疟原虫动分泌蛋白是阻断疟疾传播的目标。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
J Biol Chem 279・25
影响因子：
0
作者：
Ma L.;Teruya-Feldstein J.;Behrendt N.;Chen Z.;Noda T.;Hino O.;Cordon-Cardo C.;Pandolli P.P.;Li F et al.
通讯作者：
Li F et al.