Notch1細胞内ドメインの核移行機構の解析

Notch1胞内结构域核转位机制分析

• 批准号: 16770149
• 负责人: 関元 敏博
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770149/
• 关键词: Notch; 核移行; importin

本研究は細胞膜に結合しているNotch1からその細胞内ドメインが切り出された後、どのような輸送経路によって核へ運ばれるのかを分子レベルで解明することを目的としている。ここまでの研究により、Notch1細胞内ドメインのN末端部分が核移行シグナルとして機能することを示し、核輸送因子であるimportin α/βのシステムによって核へ輸送されることをin vitroにおける無細胞性輸送系により明らかにした。これらの結果から、当初の目的であるNotch1細胞内ドメインの核移行経路を分子レベルで解明できたといえる(投稿準備中)。興味深いことに、Notch1細胞内ドメインは核移行に必要なN末端領域を欠失させても、細胞質抽出液存在下で核への移行活性を少ないながら保持していた。このことはNotch1の細胞内ドメインにはN末端領域以外に核移行を担う領域があることを示唆しているとともに、その核移行には何らかの細胞質性因子が関わっていることが予想される。種々の欠失変異体を用いた解析から、Notch1の細胞内ドメインにはN末端領域以外にも少なくとも2ヵ所の領域が核移行を促進していることが明らかとなった。しかしながら、これらの領域をさらに削ることによって作成した変異体も核移行活性を同等に保持していた。これらのことから、Notch1の細胞内ドメインは複数の核移行シグナルを持つことが予想されるが、それらの正確な配列決定には至っていない。また当研究室で保有している核輸送因子を用いた結合実験においても、importin αを除くいずれの因子もN末端領域を除いたNotch1細胞内ドメインに対して有意な結合活性を示さなかったことから、新規の輸送因子による核輸送の可能性が考えられる。

In this study, the binding of Notch1 to the cell membrane and the intracellular binding of Notch1 to the cell membrane were analyzed.のような Transport 経路 によって Kernel へ Transport ばれるのかをmolecule レベルで Explain することをPurpose としている.ここまでの research により, Notch1 intracellular N-terminal part がnuclear migration シグナルとして function することをshow し, nuclear transport factor であるimportin α/βのシステムによってnuclear transport system in vitro acellular transport system.これらのRESULTS から、The original purpose is であるNotch1 intracellular nuclear migration path molecule レベルで clarification できたといえる (preparing for submission). The N-terminal domain is necessary for intracellular nuclear migration of Notch1 and is of great interest. In the presence of cytoplasmic extract, the migration activity of the nucleus is reduced and the migration activity is maintained.このことはNotch1のIntracellular ドメインにはNuclear migration outside the N-terminal domain があることをShowing the instigation of しているとともに, そのnuclear migration にはらかのcytoplasmic factor が Off わっていることがyu think される. The N-terminal collar of Notch1 and the intracellular N-terminal collar of Notch1にも小なくとも2ヵSOの区が无码を promoted していることが明らかとなった outside the domain.しかしながら、これらの区をさらに Cutることによって成した変variantもnuclear migration activityをequivalentにmaintainしていた. Notch1 intracellular nuclear migration complex The correct arrangement of the にをholding つことがyuxiang されるが and the それらの determines the には to っていない. The laboratory has a nuclear transport factor, a combination of nuclear transport factors, and importin. αくいずれのfactorもN-terminal domainを出いたNotch1 intracellular ドメインに対してmeaningなThe binding activity is indicated by the new transport factor and the possibility of nuclear transport.

项目成果

14‐3‐3 suppresses the nuclear localization of threonine 157‐phosphorylated p27Kip1

• DOI: 10.1038/sj.emboj.7600198
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: The EMBO Journal
• 作者: T. Sekimoto;M. Fukumoto;Y. Yoneda

Extracellular signal-dependent nuclear import of STAT3 is mediated by various importin alphas.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.03.063
• 发表时间: 2005-05
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: R. Ushijima;Naoko Sakaguchi;Arihiro Kano;A. Maruyama;Y. Miyamoto;T. Sekimoto;Y. Yoneda;K. Ogino-K.-Ogin

Importin 4 is responsible for ligand-independent nuclear translocation of vitamin D receptor

• DOI: 10.1074/jbc.m509347200
• 发表时间: 2005-12-09
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Miyauchi, Y;Michigami, T;Ozono, K
• 通讯作者: Ozono, K

Importin alpha transports CaMKIV to the nucleus without utilizing importin beta.

• 发表时间: 2005
• 期刊: The EMBO journal
• 作者: I. Kotera;T. Sekimoto;Y. Miyamoto;T. Saiwaki;E. Nagoshi;H. Sakagami;H. Kondo;Y. Yoneda

Zinc finger domain of Snail functions as a nuclear localization signal for importin β-mediated nuclear import pathway

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2005.00850.x
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Yamasaki, H;Sekimoto, T;Yoneda, Y
• 通讯作者: Yoneda, Y