抗菌薬排出蛋白質の分子機構-細菌の小型排出蛋白質を例として-

抗菌药物外排蛋白的分子机制-以小细菌外排蛋白为例-

基本信息

  • 批准号:
    16790029
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.73万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ほぼ全ての生物種の細胞膜には,細胞にとって都合の悪い様々な毒物を認識し,能動的に細胞外へと排出する多剤排出蛋白質が存在している.これらの蛋白質は,感染症治療の大きな障害である多剤耐性菌株の出現と密接に係わっている他,分子科学の面からも,構造上相関の無い多様な薬物の認識/排出という興味深い機能を実現している.本研究では,多剤排出蛋白質の中で,最もサイズが小さいSMR(small multidrug resistance)ファミリーに属する蛋白質の分子機構解明を目指した研究を行ってきた.様々な測定手法を適用するためには,蛋白質の高純度な精製が必要なため,SMR蛋白質の大腸菌における大量発現・精製を重要な課題と位置付けて研究を行った.融合タグを用いる方法で,大腸菌のEmrEの大量発現と融合蛋白質の精製は実現できたが,残念ながら,融合タグの分離が依然として困難であった.有機溶媒に溶けるほどのSMRの脂溶性の高さが,プロテアーゼ処理とその後の蛋白質の回収を困難にしていると考えられる.一方,これと平行して,枯草菌のEbrABの膜内トポロジーの決定と,その制御機構を明らかとする研究を行い,興味深い知見を得るに至った.これまでのSMRの研究は,主にEmrEを用いて行われてきた.膜内ではホモダイマーとして機能すると考えられているが,その膜内トポロジーについては,互いに異なる報告がされてきている.本研究では,ヘテロダイマーを形成するEbrABを用い,二つのモノマーが逆平行なトポロジーをとって,膜内に挿入されていることを明らかとした.また,塩基性残基の置換によって,ホモダイマーとしても機能するようになることを明らかとした.これらは,ヘテロダイマー型のEbrABについての結果であるが,おそらく,EmrEなどのホモダイマー型SMRも同様の性質を有すると考えられる.
The cell membrane of all biological species is the same as that of all cells. Toxins are recognized in all cells, and many active extracellular and excretion proteins exist. These proteins are important barriers to infection therapy, the emergence of multi-agent resistant strains, close contact, molecular science, structurally related multi-agent recognition/elimination, and deep functional realization. In this study, the molecular structure of protein in the genus SMR(small multidrug resistance) was studied. High purity purification of SMR protein is necessary for determination of SMR protein. The fusion protein was isolated from E. coli and purified from E. coli. The high lipid solubility of SMR in organic solvents makes it difficult to recover protein after treatment. In this paper, we discuss how to determine the molecular structure of EbrAB and how to control the molecular structure of EbrAB. The SMR study was conducted on the basis of the results of the study. In the film, the function of the film is different from that of the film, and the film is different from the film. In this study, EbrAB is used to detect the presence of a protein in the membrane. The basic residues are replaced by the basic residues, and the basic residues are replaced by the basic residues The results of the EbrAB test are similar to those of the SMR test.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Two-component bacterial multidrug transporter, EbrAB: Mutations making each component solely functional
A light-driven proton pump from Haloterrigena turkmenica:: Functional expression in Escherichia coli membrane and coupling with a H+ co-transporter
All-optical switching in pharaonis phoborhodopsin protein molecules
法老荧光紫红质蛋白分子的全光转换
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Okiko Miyata;Atsushi Shirai;Shintaro Yoshino;Toshiki Nakabayashi;Yoshifumi Takeda;Toshiko Kiguchi;Daisuke Fukumoto;Masafumi Ueda;Takeaki Naito.;Masuda H.et al.;Takashi Okitsu;Partha P. Mukhopadhyay;Iwaki et al.;S.Roy
  • 通讯作者:
    S.Roy
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
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    重村洋明;菊川峰志;宮内正二;出村 誠;加茂直樹;菊川 峰志;宮内正二;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi.;宮内正二;桑山健次;Seiji Miyauchi.;Kenji Kuwayama.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;Takashi Yamamoto.;宮内正二;菊川峰志;Seiji Miyauchi.;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;宮内正二;山本 崇;宮内 正二;宮内 正二;杉林 堅次;杉林 堅次
  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
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  • 发表时间:
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  • 作者:
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