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子宮筋腫増殖能に対する性ステロイドホルモン作用の解明

阐明性类固醇激素对子宫肌瘤生长潜力的影响

基本信息

批准号：
16790948
负责人：
福原健
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790948/
关键词：
子宮筋腫子宮平滑筋 hTERT estrogen progesterone

项目摘要

子宮平滑筋や子宮筋腫初代培養細胞を用いた実験において、細胞における性ステロイドホルモン受容体の発現が培養日数を経るごとに失われていくことがあり、それが培養細胞を用いた実験の問題点となる。そこで、まず子宮平滑筋の初代培養細胞に、hTERT遺伝子を導入して、生体内における性質を可能な限り温存した細胞株の樹立を目指した、子宮筋腫にて子宮摘出を行った症例より、子宮平滑筋組織由来の細胞を培養し、hTERT遺伝子をレトロウィルスベクターによって遺伝子導入しcloneを分離した。hTERT遺伝子を導入した子宮平滑筋細胞の一部のcloneでは、300日以上増殖が続き、不死化したと考えられた。蛍光染色で、vimentin,α-smooth muscle actin(αSMA)、estrogen receptor(ER)、progesterone receptor(PR)が陽性であった。初代培養20日目の子宮平滑筋細胞ではvimentin,αSMAは陽性であったが、ERα、PRは陰性であった。ERα、PRの発現を保つ不死化子宮平滑筋細胞にestradiol、progesteroneを添加すると細胞の増殖が亢進することが、WST-1 assayおよびBrdU取り込み能で明らかになった。さらに、ELISA法にて、estradiol、progesteroneいずれを添加しても、培養上清中のTGF-β1濃度の減少がみられた。一方、TGF-β1をこの不死化子宮平滑筋細胞に添加すると、細胞増殖能が減少し、性ステロイドホルモンによる子宮平滑筋細胞の増殖亢進の一部はTGF-β1の分泌低下によることが示唆された。現在、ERα、PRの発現を維持している不死化子宮筋腫細胞の作成に取り組んでおり、子宮平滑筋細胞と比較して、性ステロイドホルモンやTGF-β1に対する反応が異なるか検討中である

In the first generation, the smooth tendons were cultured, the cells were cultured, the cells were cultured, and the cells were cultured. The number of days of culture was measured. The primary culture of smooth tendons, the growth of hTERT cells, the introduction of cells in vivo, the growth of warm cells, the establishment of cells, the extraction of symptoms, the tissue origin of smooth tendons, the tissue of smooth tendons The hTERT baby has been introduced into the smooth muscle cell of the clone, which has been colonized for more than 300 days and immortalized. Light staining, vimentin, α-smooth muscle actin (α-smooth muscle actin), estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR) were observed. In the first generation, the smooth muscle cells were vimentin, α SMA, ER α, PR. ER α and PR genes showed that immortalized plasmids were protected by estradiol, progesterone cells were added, cell proliferation was increased, and BrdU was extracted from WST-1 assay cells. The concentration of TGF- β 1 in the supernatant was less than that in the supernatant of TGF- β 1, which was added by Elisa, Elisa and Elisa. On the one hand, TGF- β 1, immortal, smooth muscle, cell, cell, immortalizer, immortalizer, Now, ER α, PR are able to maintain the immortalized cells in the tissue, smooth muscle cells, TGF- β 1 cells, anti-cancer cells, and so on.