紡錘体機能における染色体パッセンジャータンパク質の役割

ショウジョウバエや酵母において染色体分配の調節タンパク質として同定されたプロテインキナーゼのヒトホモログであるAurora-A,Aurora-BおよびAurora-Cは様々ながん組織においてDNA増幅やタンパク質の発現増強が高率に認められている。細胞分裂期のピストンH3キナーゼであるAurora-B,およびその活性化タンパク質であるINCENPを含む"染色体パッセンジャータンパク質"複合体(分裂前期までは染色体上に局在し,分裂後期には中央紡錘体へとダイナミックに局在を変化させる)は染色体分配に必須である。本研究の目的は,上記複合体の相互作用分子を染色体分配前後において網羅的に同定・機能解析することで,紡錘体機能の制御機構を明らかにしてきた。●昨年度までに同定したAuroraファミリーの新規基質、微小管プラス端集積因子(+TIPs)に属するEBファミリーのホモログのひとつであるEB3のAurora-AおよびBによるリン酸化の意義を検討した。・EB3は同じEBファミリーのEB1と異なり不安定なタンパク質で、M-G_1移行時にRINGフィンガー型のユビキチンリガーゼ(E3)であるSIAH-1によりユビキチン化され、26Sプロテアソームで分解されることを明らかにした。さらに、SIAH-1によるEB3の分解はM期でのAuroraによるEB3のリン酸化で阻害されることを明らかにした。細胞周期でのEB3タンパクレベルの変動は、Auroraによるリン酸化とSIAH-1による分解で制御されているという機構を明らかにした。

ショウジョウバエや酵母において染色体分配の調節タンパク質として同定されたプロテインキナーゼのヒトホモログであるAurora-A,Aurora-BおよびAurora-Cは様々ながん組織においてDNA増幅やタンパク質の発現増強が高率に認められている。細胞分裂期のピストンH3キナーゼであるAurora-B,およびその活性化タンパク質であるINCENPを含む"染色体パッセンジャータンパク質"複合体(分裂前期までは染色体上に局在し,分裂後期には中央紡錘体へとダイナミックに局在を変化させる)は染色体分配に必須である。本研究の目的は,上記複合体の相互作用分子を染色体分配前後において網羅的に同定・機能解析することで,紡錘体機能の制御機構を明らかにしてきた。●昨年度までに同定したAuroraファミリーの新規基質、微小管プラス端集積因子(+TIPs)に属するEBファミリーのホモログのひとつであるEB3のAurora-AおよびBによるリン酸化の意義を検討した。・EB3は同じEBファミリーのEB1と異なり不安定なタンパク質で、M-G_1移行時にRINGフィンガー型のユビキチンリガーゼ(E3)であるSIAH-1によりユビキチン化され、26Sプロテアソームで分解されることを明らかにした。さらに、SIAH-1によるEB3の分解はM期でのAuroraによるEB3のリン酸化で阻害されることを明らかにした。細胞周期でのEB3タンパクレベルの変動は、Auroraによるリン酸化とSIAH-1による分解で制御されているという機構を明らかにした。