神経細胞系譜形成過程において機能するmiRNAの同定とその機能解析

我々は昨年度までに、LNA(Locked Nucleic Acid)修飾を施したアンチセンスオリゴヌクレオチドをプローブとして用い、さらに胚の固定法を改善することで、成熟型miRNAの発現様式を解析するためのwhole mount in situ Hybridization法を確立した。今年度は、本法を用いて、種々のmiRNAの発現様式を解析し、神経系において発現しているmiRNAを同定した。また、発現様式を指標に、いくつかのmiRNAを選定し、これらのmiRNAに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて機能阻害実験を行った。しかし、これまでに、神経幹細胞系譜形成に顕著な異常を見いだすことができていない。Gal4-UASシステムを用いた過剰発現実験を行うためのトランスジェニックショウジョウバエを作製し、miRNA過剰発現実験も平行して行っており、これらの結果をもとに、神経幹細胞系譜形成過程に影響するmiRNAの同定を目指している。また、平成18年10月よりMemorial Sloan-Kettering Cancer Center, Lai研究室に海外渡航し、研究を続けている。本研究室においては、新規miRNAの同定、網羅的発現解析および機能解析を精力的に行っており、miRNA解析のための実験材料、実験手法が充実している。現在、Lai研究室において、さらに多くのmiRNAの発現解析、機能解析を進めている。

我々は昨年度までに、LNA(Locked Nucleic Acid)修飾を施したアンチセンスオリゴヌクレオチドをプローブとして用い、さらに胚の固定法を改善することで、成熟型miRNAの発現様式を解析するためのwhole mount in situ Hybridization法を確立した。今年度は、本法を用いて、種々のmiRNAの発現様式を解析し、神経系において発現しているmiRNAを同定した。また、発現様式を指標に、いくつかのmiRNAを選定し、これらのmiRNAに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて機能阻害実験を行った。しかし、これまでに、神経幹細胞系譜形成に顕著な異常を見いだすことができていない。Gal4-UASシステムを用いた過剰発現実験を行うためのトランスジェニックショウジョウバエを作製し、miRNA過剰発現実験も平行して行っており、これらの結果をもとに、神経幹細胞系譜形成過程に影響するmiRNAの同定を目指している。また、平成18年10月よりMemorial Sloan-Kettering Cancer Center, Lai研究室に海外渡航し、研究を続けている。本研究室においては、新規miRNAの同定、網羅的発現解析および機能解析を精力的に行っており、miRNA解析のための実験材料、実験手法が充実している。現在、Lai研究室において、さらに多くのmiRNAの発現解析、機能解析を進めている。