浸潤突起においてMT1-MMPと相互作用する因子の網羅的解析

侵袭伪足中与MT1-MMP相互作用的因素综合分析

基本信息

批准号：
05J11992
负责人：
星野大輔
金额：
$ 1.73万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J11992/
关键词：
MT1-MMP RhoA 浸潤突起フォーカストプロテオミクス MMP9

项目摘要

浸潤突起においてMT1-MMPと結合する分子としてX4を同定した。X4を発現させるとCdc42、Racの活性化には影響を及ぼさないがRhoA特異的に活性化が亢進した。さらにX4はRhoGDIとは結合しないが、p27^<kiPl>と直接結合しRhoAをp27^<kiPl>から解離させることを見出した。その結果、p27^<kiPl>非結合型RhoAはGEFsが結合可能となり活性化が亢進する。shRNAを用いて内在性X4をノックダウンしたところ、p27^<kiPl>とRhoA複合体が増加し、LPA、PMA刺激によるRhoA活性化が減少した。一方、siRNAにより内在性p27^<kiPl>をノックダウンするとRhoA活性化が亢進し、この際X4を発現させてもRhoA活性化はこれ以上増加しなかった。このことから、X4はp27^<kiPl>経路を介してRhoA活性化を制御していることが明らかになった。一方、X4は浸潤突起においてMT1-MMPと結合する分子として同定されたことから、X4の局在を調べた。X4は浸潤突起でMTI-MMP、コルタクチンと共局在することが明らかになった。さらに、X4発現抑制細胞では浸潤突起形成が有意に抑制された。これらのことから、X4は浸潤突起でRhoA活性化を調節することで浸潤突起形成を制御することが示唆された。浸潤突起は、癌転移に重要な役割を果たすことが多数報告されており、X4は癌転移の治療に大いに貢献する可能性がある。

X4被确定为在侵入性过程中结合MT1-MMP的分子。 X4的表达不会影响CDC42或RAC的激活，但是Rhoa特异性激活得到了增强。此外，发现X4不与Rhogdi结合，而是直接与P27^<Kipl>结合，并将RhoA与P27^<kipl>分离。结果，p27^<kipl> -unbound Rhoa能够与GEF结合，从而增加激活。当使用shRNA击倒内源性X4时，p27^<kipl>和RhoA复合物增加，LPA和PMA刺激的RhoA激活减少。另一方面，用siRNA增强的RhoA激活将内源性P27^<kipl>击倒，并且当表达X4时，RhoA激活不会进一步增加。这表明X4通过p27^<kipl>途径调节RhoA激活。另一方面，X4被鉴定为在侵入性突出中与MT1-MMP结合的分子，因此研究了X4的定位。在侵入性过程中发现X4与MTI-MMP和Cortactin共定位。此外，在X4表达抑制细胞中，侵入性过程形成显着抑制。这些表明X4通过调节侵入性过程中的RhoA激活来调节侵入性过程形成。据报道，许多侵入性过程在癌症转移中起着重要作用，X4可能对癌症转移的治疗产生巨大贡献。