腫瘍内不均一性を反映したシングルセルオルガノイド培養系の構築と薬剤耐性機構の解明

反映瘤内异质性的单细胞类器官培养系统的构建及耐药机制的阐明

• 批准号: 21K07209
• 负责人: 星野 大輔
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kanagawa Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07209/
• 关键词: オルガノイド; 未分化癌; シングルセル培養; シングルセル; 腫瘍内不均一性; 薬剤抵抗性

がん治療を困難にしている原因として腫瘍内不均一性があげられる。これまでに、臨床検体を用いた病理学的解析と遺伝学的解析により腫瘍内不均一性の理解が深まってきたが、その生物学的特性にまで踏み込んだ研究は多くない。この原因として、腫瘍組織と同程度の腫瘍内不均一性を保持した培養細胞株の欠如があげられる。これらの問題点を解決するため、申請者は難治・希少がんを対象とした、患者由来オルガノイドライブラリーの構築を行なってきた。そこで本研究では、最初に、申請者が樹立した難治がん患者由来オルガノイド培養株を基軸として、シングルセルオルガノイド培養株を樹立することを目的とした。2021 年度は、これまでに樹立した甲状腺未分化癌オルガノイドを用いて、限界希釈して 96 ウエルでオルガノイド培養した。翌日、顕微鏡下でシングルセルとなっているウエルに印をつけ、印のあるウエルの拡大培養を試みた。各株、10 クローン以上取得できた。甲状腺未分化癌は、非常にヘテロジェナイェティーが高いことが病理像より知られているが、形態変化と生物学的特性の関係性が不明である。そこで、シングルセル化したクローンを用いて、細胞増殖時における増殖因子の要求性などを調べたところ、各クローン間で性質が異なることが明らかになった。2022 年度は、これらの増殖因子要求性とK-Ras 遺伝子変異が相関することを見出した。また、様々な抗がん剤御応答性を各シングルクローンを用いて評価したところ、様々な結果が得られたが、K-Ras 遺伝子変異との相関はみられなかった。

The cause of the problem is the cause of the heterogeneity. The analysis of pathology, the analysis of pathology, the analysis of internal heterogeneity, the understanding of biological characteristics, the analysis of pathology, the analysis of internal heterogeneity, and the characteristics of biology. Because of the same degree of heterogeneity in the tissue and the cause, the cell line is not as good as that of the cell line. Please tell me how to solve the problem, the applicant, the doctor, the patient, the patient. In this study, at the beginning of the study, the applicant was asked to treat the patient in order to treat the patient. In the year of 2021, undifferentiated thyroid cancer was established, and the limit was established. On the following day, you will make sure that the printing and printing will be carried out on the following day. Each plant, more than 10 years old, obtained more than 10 years old. Undifferentiated thyroid carcinoma, very poor thyroid cancer, abnormal thyroid cancer, thyroid undifferentiated carcinoma, thyroid undifferentiated carcinoma, undifferentiated thyroid carcinoma, undifferentiated thyroid carcinoma, un In order to obtain information about the use of cell culture, cell culture and reproductive factors, we need to know that there is a significant difference between the control group and the control group. in this way, we need to know that there is a need for a variety of reproductive factors. In the year of 2022, the reproductive factors of the year 2022 were asked for by the K-Ras family. The results of the test, the K-Ras test, the response, the response, the