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マウスモデルにおける生殖細胞での遺伝子治療の可能性の検討

在小鼠模型中检查生殖细胞基因治疗的可能性

基本信息

批准号：
16689008
负责人：
篠原隆司
金额：
$ 18.97万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16689008/
关键词：
幹細胞精子形成移植ゲノム遺伝子分化バイオテクノロジー

项目摘要

本研究の目的は精子幹細胞において相同組み替え現象を証明し、その細胞から個体化を行うことである。本年度我々はマウス精子幹細胞(Germline stem, GS細胞)に遺伝子導入を行い、マウスオクルジン遺伝子を破壊するベクターを用いて、オクルジン遺伝子の破壊マウスの作成に成功した。この結果、相同組み替えの頻度は2.3%であり、これは現在幅広く行われているマウスのEmbryonic stem (ES)細胞を用いた場合の相同組み替えの結果(4.5%)に対してやや低いものの十分に精子幹細胞を用いても遺伝子ノックアウトマウスの作成が可能であることを示すはじめての結果である。実際には我々の実験結果は遺伝子導入されたDNAが129マウスの由来で細胞がDBA2マウスだったために、この効率は同じ系統のDNAを使っていれば5-10倍の効率の改善が可能であったことが見込まれており、精子幹細胞はES細胞を利用した場合と少なくとも同等か、それ以上の頻度で相同組み替えを起こすことが可能であることを示すものでもある。またさらに我々は異種の精巣を使い、ラットの産仔をマウスを仮親にして作成することにも成功した。これによりラットの飼育スペースの作成とその子孫作成にかかる時間を短縮(通常は3ケ月かかるところを6週間に短縮)することに成功した。この両実験結果はともにProc Natl Acad Sci USA誌のNews articleとして取り上げられ、国内外の報道機関で幅広く報道されるに至った。現在我々のグループはこのマウスでの結果をほかの動物種(特にラット)へと展開し、これまで不可能であったマウス以外の動物種におけるノックアウト動物作成を次の目標として実験を展開している。

The purpose of this study is to prove the same group of sperm stem cells, and the individualization of sperm stem cells This year, we have successfully introduced and produced sperm stem cells (GS cells) into sperm cells. The results showed that the frequency of the same group of stem cells was 2.3%, and the results of the same group of stem cells were 4.5%. In fact, the results show that the DNA introduced into the sperm stem cells is 129 times higher than that of the DBA2 cells, and the efficiency of the DNA introduced into the sperm stem cells is 5-10 times higher than that of the DBA2 cells. We're going to have a baby. The time taken to create the breeding ground is shortened (usually 3 months). The results of this report are as follows: Proc Natl Acad Sci USA News article Now, we have to find out the results of animal species (special species) and develop them. It is impossible to find animal species other than animals.