細胞移植による体性幹細胞と生殖細胞の互換性の解析

细胞移植分析成体干细胞与生殖细胞的相容性

• 批准号: 14034227
• 负责人: 篠原 隆司
• 金额: $ 4.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14034227/
• 关键词: 精子形成; 幹細胞; 不妊; 移植; 培養; 精子幹細胞; 精子; 生殖細胞; 精巣

精子幹細胞は精子形成の源にある幹細胞である。精子幹細胞の細胞の直接の前駆細胞である始原生殖御はLeukemia inhibitory factor (LIF),basic fibroblast growth factor(bFGF),Steel factor (S1)の存在下で培養するとEmbryonic stem (ES)細胞様の細胞に変化し、Embryonic germ (EG)細胞として多分化能を獲得することが知られている。我々は精子幹細胞も培養条件においては可塑性を示すのではないかと考え、精子幹細胞の培養実験を行った。Epidermal growth factor,bFGF,Glial cell-derived neurotrophic factor,LIFの添加により、胎児線維芽細胞上で培養を行い、マウス精子幹細胞を5ヶ月以上に期間にわたり増幅を行うことに成功した。増幅された幹細胞は不妊マウスの精細管内に移植することで、正常な精子・子孫を作ることができた。これまでに生殖細胞を増幅する方法としてはES細胞とEG細胞の二つが存在するが、この両者と区別するために我々はこの培養細胞にGermline stem(GS)細胞と名付けた。この方法は精子幹細胞における遺伝子操作の基盤技術となるものである。我々はこのGS細胞の分化可塑性を調べるために、成体マウスへの静脈注射実験、胚盤胞への、移植実験を行ったが、現在までのところ可塑性を認めるには至っていない。現在我々は試験管内において培養条件を更に変化させることで多分化能を持つか否かを検討している。

Sperm stem cells are the source of sperm formation Sperm stem cells are cultured in the presence of Leukemia inhibitory factor (LIF),basic fibroblast growth factor(bFGF), and Steel factor (S1) to induce differentiation of Embryonic stem (ES) cells and Embryonic germ (EG) cells. The study of sperm stem cell culture conditions shows that sperm stem cell culture can be carried out under different conditions. Epidermal growth factor,bFGF,Glial cell-derived neurotrophic factor,LIF were added to the culture of embryonic stem cells for more than 5 months. Stem cell transplantation in vitro The method for increasing the amplitude of germ cells is to differentiate between ES cells and EG cells, and to culture Germline stem(GS) cells. This method involves the manipulation of sperm stem cells and substrate technology. The differentiation plasticity of these GS cells is regulated in the early stage, in the adult stage, by intravenous injection, in the blastoderm stage, in the transplantation stage, and in the present stage, in the early stage and in the middle stage. Now I'm trying to change the culture conditions in the tube.

项目成果

Shinohara, T., et al.: "Restoration of Spermatogenesis in Infertile Mice by Sertoli Cell Transplantation"Biology of Reproduction. 68. 1064-1071 (2003)

Shinohara，T.，等人：“通过支持细胞移植恢复不育小鼠的精子发生”生殖生物学。

Yoshimoto, M. et al.: "Direct visualization of transplanted hematopoietic cell reconstitution in intact mouse organs indicated the presence of a niche"Exp Hematol. 31. 733-740 (2003)

Yoshimoto, M. 等人：“完整小鼠器官中移植造血细胞重建的直接可视化表明存在一个生态位”Exp Hematol。

T.Shinohara et al.: "Birth of offspring following transplantation of cryopreserved immature testicular piece and in vitro micro insemination"Hum. Reprod.. 17. 3039-3045 (2002)

T.Shinohara 等人：“冷冻保存的未成熟睾丸片移植和体外微授精后后代的诞生”Hum。

M.Kanatsu-Shinohara et al.: "Adenovirus-mediated gene delivery and in vitro microinsemination produce offspring from infertile male mice"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99. 1383-1388 (2002)

M.Kanatsu-Shinohara 等人：“腺病毒介导的基因传递和体外显微授精从不育雄性小鼠中产生后代”Proc。

Kanatsu-Shinohara, M. et al.: "Long-term proliferation in culture and germline transmission of mouse male germline stem cells."Biology of Reproduction. 69. 612-616 (2003)

Kanatsu-Shinohara, M. 等人：“小鼠雄性生殖系干细胞在培养物中的长期增殖和生殖系传递。”生殖生物学。