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哺乳類精子幹細胞長期培養系の確立

哺乳动物精子干细胞长期培养体系的建立

基本信息

批准号：
16650093
负责人：
篠原隆司
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650093/
关键词：
遺伝子ゲノム幹細胞分化バイオテクノロジー精子形成移植

项目摘要

本申請においてはこれまで遺伝子操作の難しかった実験動物、家畜類の精子幹細胞の長期培養系の確立を目標としている。本年度の研究においては、一昨年に我々が確立したマウスの精子幹細胞の長期培養系(GS細胞培養系)の培養条件を改変することにより、ラットの精子幹細胞の長期培養系の確立を試みた。マウスのGS細胞の培養条件のうち、EGF, bFGF, LIF, GDNF等のサイトカインの濃度を改変したが、著しい効果はなかった。しかし我々が報告したCD9抗原に対する抗体を用いたMACSによる精子幹細胞純化法により、ラットのGS細胞の培養が可能となった。ラットGS細胞は8ヶ月以上持続して培養することができた。この細胞を培養期間の様々なtime pointで免疫不全であるヌードマウスの精細管内に移植を行ったところ、組織学的に正常な精子形成を行った。次にこのように異種の精巣中で形成されたラットGS細胞由来の精子が実際に子孫を作成する能力があるかどうかをラット卵への顕微授精により調べることにした。その予備実験として、我々はEGFPトランスジェニックラットの精巣の細胞をヌードマウスの精巣に移植し、形成されたEGFP発現のあるコロニーからドナーラット由来の精子細胞を採取し、これをラット卵に顕微授精を行った。その結果、正常なラット子孫を作成することに成功した。現在この方法をラットGS細胞由来の精子に適用を試みている。

This application applies for the long-term cultivation of sperm cells in animals, livestock and livestock to ensure that the target is established. In this year's study, we established a long-term sperm cell culture system (GS cell culture system) to improve the quality of sperm cell culture system. The GS cell culture conditions, such as EGF, bFGF, LIF, GDNF, etc., are required to improve the quality of the cells. We reported that we used MACS, sperm, cytopathic acid, cell culture and GS cell culture to detect the possibility of infection. Please keep your GS cell for more than 8 months. During the period of cell culture, the immune insufficiency of time point was detected, and the spermatogenesis of normal spermatozoa was detected by histology. The formation of GS cells in various semen samples has resulted in the formation of sperm cells. The spermatozoa have the ability to do so. The eggs have been microfertilized, and the eggs have been microfertilized. The reason for this is that the sperm cells are harvested, the sperm cells are implanted, the sperm cells are implanted, the sperm cells are harvested, the sperm cells are collected, and the sperm cells are collected. According to the results of the test, the results showed that the normal children were successfully successful. Now, the method is to determine the origin of GS cells. Sperm is used to treat sperm.

项目成果

期刊论文数量（19）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Transgenic mouse produced by retroviral transduction of male Germ line stem cells in vivo.

通过体内雄性生殖系干细胞的逆转录病毒转导产生的转基因小鼠。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biol.Reprod. 71
影响因子：
0
作者：
Hashi;Y.et al.;谷口英樹;Kanatsu-Shinohara M.et al.;坂本比呂志;Kanatsu-Shinohara M.et al.;谷口英樹;戴国友;Kanatsu-Shinohara M.et al.
通讯作者：
Kanatsu-Shinohara M.et al.

Long-term culture of mouse male germline stem cells under serum- or feeder-free conditions