ダイオキシン関連物質による虹彩・毛様体、網膜発現遺伝子への影響
二恶英相关物质对虹膜、睫状体和视网膜基因的影响
基本信息
- 批准号:17791257
- 负责人:
- 金额:$ 1.73万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.ダイオキシン関連物質である3-メチルコラントレン(以下3MC)をマウスに隔日で腹腔投与し、対象にはオリーブオイルを腹腔投与した。1週間目に屠殺。虹彩毛様体、網膜をそれぞれ分離し、RNAを抽出。ダイオキシンの代謝物質であるCYP1A1が3MC投与群のみで上昇していることを確認した。前述のRNAを用いてオリゴマイクロアレイを行った。その結果、炎症系サイトカインなどの変動はなかった。EPAS-1やVEGFなどの血管新生に作用する物質が上昇していた。2.マウスに3MCを腹腔投与し、15日毎に眼底を確認した。ダイオキシンの影響は数日では現れなかった。少量のダイオキシンにて、2週間程度では病理的、肉眼的に影響は得られなかった。しかし、少量といえダイオキシンを連日投与し、基材がオリーブオイルのためか途中、マウスは死亡していったため、実験を中止した。3.次に3MCより毒素の高いTCDDを用いて実験を行った。人の網膜色素上皮細胞であるARPE-19を用いて、量依存的、時間依存的にVEGF-Aがどう変化するかウエスタンブロット、ノザンブロットを用いて実験した。発現量のVEGF-Aの蛋白が少量なのかウエスタンブロットでは結果がでなかった。ノザンブロットではTCDDの濃度を0nM,1nM,10nM,100nM,1000nMのふったのだが、10nMで発現が高かった。ある程度のダイオキシン濃度になると細胞毒性がおき、発現が減少するのではないかと考えた。時間的に0,2,6,12,18,24,48時間とふったが、18時間にて発現が高かった。4.TCDDを14日間腹腔投与、コントロールにオリーブオイルを投与。屠殺後眼球を摘出。虹彩毛様体、網膜をそれぞれ分離し、RNAを抽出。これを用いてVEGF-A、VEGF-B、ダイオキシン代謝関連物質であるCYP1A1およびCYP1B1のリアルタイムPCRを行った。また、CYP1A1がTCDD投与群にて、虹彩毛様体と網膜において上昇していたことを確認した。今後、他のリアルタイムを進めていく予定である。
1. Related substances: 3-MC (hereinafter referred to as 3MC) A week of slaughter. The iridescent hair, retina, and RNA were isolated. CYP1A1 and CYP1A1 were identified as metabolites in the group. The above mentioned RNA is used in the process of production. As a result, inflammation is the most common cause of inflammation. EPAS-1, VEGF and angiogenesis substances are elevated. 2. The 3MC was cast into the fundus on the 15th A few days later, he was arrested. A small amount of red ink, 2 weeks later, the degree of pathological, naked eye effects are obtained. A small amount of the material was thrown into the air. 3. The third time, MC and TCDD were used in the process. ARPE-19 in human retinal pigment epithelial cells is used in a quantity-dependent and time-dependent manner. A small amount of VEGF-A protein was detected and the results were satisfactory. The concentration of TCDD was 0nM,1nM,10nM, 1000nM and 10nM respectively. The level of cytotoxicity is reduced. Time 0, 2, 6, 12, 18, 24, 48 time, 18 time 4. TCDD 14-day abdominal cavity cast and, Eyeballs removed after slaughter. The iridescent hair, retina, and RNA were isolated. This is the case with VEGF-A, VEGF-B and CYP1A1. CYP1A1 and TCDD were identified in the group, rainbow hair and retina. From now on, he will be able to make progress in the future.
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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