デジタル・ディファレンシャルディスプレーによる歯特異的遺伝子のスクリーニング

使用数字差异显示筛选牙齿特异性基因

• 批准号: 17791579
• 负责人: 福本 恵美子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791579/
• 关键词: 発生、分化; 歯学; エナメル芽細胞; スクリーニング

NCBIのデータベースを用いて、我々の研究グループが作製したマウス歯胚ライブラリーと、他組織(中枢神経組織、肝臓、肺、腎臓、筋肉、皮膚等)と発現の異なる遺伝子につきin silicoでデジタル・ディファレンシャルディスプレー法により比較した結果、歯胚に特に多く発現が認められるいくつかの分子を同定することができた。その中でも、特に他臓器よりも歯胚で発現が多く認められたアネキシン2について解析を進めた。初めに、実際の組織上でのアネキシン2の発現を調べたところ、エナメル芽細胞に時期特異的にアネキシン2が発現していることが確認された。アネキシン2はエナメル芽細胞の分化段階において、前分泌期には認められなかったが、分泌期に発現し始め、徐々に発現量が増加し、成熟期後期に最も発現が多かった。次にアネキシン2のエナメル芽細胞での機能を調べるために、ラット歯胚mRNAからRT-PCR法によりアネキシン2を増幅し、pEF6/V5-HisTOPOベクターに組み込み、アネキシン2発現ベクターを作製し歯原性上皮細胞に形質導入し、細胞中のmRNAレベルでの様々な分子の発現量の違いをマイクロアレイで解析した。その結果、アネキシン2過剰発現細胞で増加していたmRNAはkeratin comples 1 acidic gene-15、カルシトニン、FGF14などであり、減少していたmRNAはBMP15、タイトジャンクションの接着因子であるclaudin-12、FGF20などであった。また、アネキシン2過剰発現細胞を用いた歯牙特異的遺伝子についてのRT-PCR解析では、アメロブラスチンの発現が減少しエナメリンの発現が増加していた。さらに、蛋白レベルでの結合解析を進めている。

NCBI's research has been used in the study of biological diversity and other tissues (central nervous system, liver, lung, kidney, muscle, skin, etc.), and the development of different genes in silico. In the middle of the game, there are many ways to solve the problem. In the early stage and in the actual stage, the occurrence of the gene 2 in the tissue was regulated, and the occurrence of the gene 2 in the embryonic cell was confirmed. The differentiation stage of bud cells in the early stage, the late stage and the late stage of maturity increased. In addition, the expression of pEF6/V5-HisTOPO mRNA was detected by RT-PCR, and the expression of pEF6/V5-HisTOPO mRNA was detected by RT-PCR. As a result, the expression of keratin 2 mRNA increased and decreased in keratinocytes, acidic gene-15, collagen, FGF14, BMP15, collagen and adhesion factors claudin-12 and FGF20. RT-PCR analysis of Dentist-specific DNA fragments in the presence of Dentist-specific DNA fragments decreased the presence of Dentist-specific DNA fragments and increased the presence of Dentist-specific DNA fragments. Today, the binding analysis of proteins is advancing.

项目成果

Glycolipids regulate ameloblast differentiation

糖脂调节成釉细胞分化

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Oral Biosci (In press)
• 作者: Fukumoto S.;Yamada A.;Fukumoto E.;Yuasa K.;Yoshizaki K.;Iwamoto T.;Nonaka K.
• 通讯作者: Nonaka K.

GD3 synthase gene found expressed in dental epithelium and shown to regulate cell proliferation.

GD3 合酶基因被发现在牙上皮中表达，并被证明可以调节细胞增殖。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Archives of Oral Biology 50・4
• 作者: Fukumoto S;et al.;Ida-Yonemochi H;Yamada A
• 通讯作者: Yamada A

Laminin alpha5 is required for dental epithelium growth and polarity and the development of tooth Bud and shape.

层粘连蛋白 α5 是牙齿上皮生长和极性以及牙芽和形状发育所必需的。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 24;281(8)
• 作者: Fukmaoto S;Miner JH;Ida H;Fukumoto E;Yuasa K;Miyazaki H;Hoffman MP;Yamada Y.
• 通讯作者: Yamada Y.

Amelogenin is a negative regulator of osteoclastogenesis via downregulation of RANKL, M-CSF and fibronectin expression in osteoblasts

• DOI: 10.1016/j.archoralbio.2006.09.016
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY
• 影响因子: 3
• 作者: Nishiguchi, Miyuki;Yuasa, Kenji;Fukumoto, Satoshi
• 通讯作者: Fukumoto, Satoshi