SMC複合体によるDNA二重鎖切断に伴う染色体動熊制御機構の解析

SMC复合物与DNA双链断裂相关的染色体运动控制机制分析

• 批准号: 17687001
• 负责人: 菱田 卓
• 金额: $ 19.3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17687001/
• 关键词: DNA相同組換え; DNA二重鎖切断; プロテアーゼ; 大腸菌; RecN; SMCファミリー; DNA修復; 染色体動態制御; タンパク質分解

大腸菌RecNは、染色体構造維持(SMC;structural maintenance of chromosomes)ファミリーに属し、DNA二重鎖切断修復に関与しているが、RecNがどのような因子と相互作用し、また、制御されているのかに関しては不明であった。本研究では、RecNタンパク質と相互作用する因子を同定することでRecNの機能を明らかにする目的で研究を行った。本研究で作成した抗RecN抗体を用いた解析から、RecNは、半減期が非常に早いタンパク質であり、その分解がAAA+型プロテアーゼClpXPによって特異的に引き起こされていることを見いだした。さらに、RecNの分解が起こらない条件下では、RecNは凝集体として細胞質に蓄積し、慢性的なDNA損傷ストレスに対する耐性が著しくて以下することを明らかにした。また、Flag-RecNと相互作用する因子をMass解析により同定した結果、その中に、組換え反応において中心的な役割を果たすRecAを見いだし、実際、精製タンパク質問及びin vivoにおける免疫沈降実験によって相互作用を明らかにすることが出来た。さらに、この相互作用を失ったRecAの変異体を同定し、解析した結果、RecNの損傷部位へのリクルートが著しく低下することを見いだした。この結果から、RecNは、RecAとの相互作用によって二重鎖切断部位に結合し、染色体構造を安定化することで、その後の組換え反応の促進に役立っていることが考えられる。

E. coli RecN, structural maintenance of chromosomes (SMC;structural maintenance of chromosomes), DNA double lock repair, RecN, factor interaction, control, and control. The purpose of this study is to determine the identity of RecN and its function. In this study, anti-RecN antibodies were used to analyze, recN, and half-life. Under these conditions, RecN aggregation and accumulation in the cytoplasm, chronic DNA damage, and resistance to the following conditions, Mass analysis, Flag-Recn interaction factors, results, composition, center, results Reca interaction factors, results, results In addition, the interaction between RecA and B is different, and the results of analysis are different. The interaction between RecN and RecA results in the binding of the double lock cleavage site, the stabilization of the chromosome structure, and the promotion of the post-transformation.

项目成果

Degradation of Escherichia coli RecN Aggregates by ClpXP Protease and Its Implications for DNA Damage Tolerance.

ClpXP 蛋白酶对大肠杆菌 RecN 聚集体的降解及其对 DNA 损伤耐受性的影响。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 281
• 作者: Nagashima;T.;et al.
• 通讯作者: et al.

Functional and physical interaction of yeast Mgs1 with PCNA:: Impact on RAD6-dependent DNA damage tolerance

• DOI: 10.1128/mcb.00307-06
• 发表时间: 2006-07-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Hishida, Takashi;Ohya, Tomoko;Shinagawa, Hideo
• 通讯作者: Shinagawa, Hideo

Functional overlap between RecA and MgsA (RarA) in the rescue of stalled replication forks in Escherichia coli

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2005.00831.x
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: Genes to Cells
• 影响因子: 2.1
• 作者: T. Shibata;T. Hishida;Yoshino Kubota;Yong-Woon Han;H. Iwasaki;H. Shinagawa

Essential and distinct roles of the F-box and helicase domains of Fbhl in DNA damage repair.

Fbhl 的 F-box 和解旋酶结构域在 DNA 损伤修复中具有重要而独特的作用。

• 发表时间: 2008
• 期刊: BMC Mol. Biol. In press
• 作者: Sakaguchi;C.;et;al.
• 通讯作者: al.

Rhp51-dependent recombination intermediates that do not generate checkpoint signal are accumulated in Schizosaccaromyces pombe rad6O and smc5/6 mutants after release from replication arrest.

不产生检查点信号的 Rhp51 依赖性重组中间体在裂殖酵母 rad6O 和 smc5/6 突变体中从复制停滞释放后积累。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Molecular and Cellular Biology 26
• 作者: Miyabe;I.;et al.
• 通讯作者: et al.