DNA二重鎖切断センサーKuタンパク質から探る温熱の生物作用の基本原理
利用 DNA 双链断裂传感器 Ku 蛋白探索热生物效应的基本原理
基本信息
- 批准号:21659285
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
私はこれまでに、DNA-PKの温熱処理で失活し、その原因はKuサブユニットにあること、温熱によるDNA-PK失活の起こり方は生物種によって異なることを明らかにしてきた。本研究は、44℃までの温熱処理がほとんど生存率に影響しないという特性を持つトリBリンパ球DT40細胞をホスト細胞として用いた遺伝子導入実験により、(1)温熱によるDNA-PK失活の生物種による違いの原因はKuの構造の違いによるものか、また、Ku86、Ku70のどちらに原因があるか、を明らかにする、(2)キメラタンパク質や点変異体の作製、解析により、温熱感受性に関係する構造的要因を探る、(3)温度感受性が異なるKuを発現する細胞における温熱放射線増感効果を検討することにより、温熱の放射線増感作用発現におけるKuの失活の寄与を評価する、ことを目的としている。まず、ホストとなるDT40のKu70およびKu80欠損細胞を入手し、Ku70およびKu80の発現状態やDNA損傷に対する応答性などを調べた。次に、ヒト、マウス細胞からRT-PCR法により、Ku86、Ku70の全長cDNAをクローニングした。なお、遺伝子導入の予備実験を行ったところ、これまでに哺乳類細胞で用いていたベクターおよび遺伝子導入法では、効率やタンパク質発現レベルに問題があったため、ベクターの改変や種々の遺伝子導入法の比較により、最適化を行った。DT40細胞でKu、あるいはDNA-PKのin situでの活性を見るのに簡便でよい方法は従来なかった。そこで、私が哺乳類細胞で見出したXRCC4のリン酸化を用いることを考案し、トリXRCC4遺伝子をクローニングした。その結果、現在データベースに登録されているトリXRCC4は部分断片で、重要な領域が欠けていたことが判明した。
Private information on inactivation, DNA-PK on inactivation, cause of inactivation on Ku, temperature on inactivation of DNA-PK, and on-site monitoring of biological species are required. In this study, 44 ℃ temperature, 44 ℃, temperature, temperature The effects of temperature sensitivity, Ku sensitivity, temperature sensitivity, temperature I don't know why I want to do this. Start with DT40, Ku70, Ku80, Ku70, DNA, Ku80, response, sex, etc. The whole length of cDNA, Ku86, Ku70 in the second, second This is the most effective way to improve the performance of mammalian cells, and to improve the safety of mammalian cells in the first place. The DT40 cell Ku, the DNA-PK cell in situ activity, see the stool method to determine the activity. In recent years, breast-feeding and private mammals have reported that XRCC4 acidizing equipment is used for acidification, and that XRCC4 products are used to improve acidification efficiency. The results show that some fragments have been found in the XRCC4, and the important fields have not been identified.
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
DNA切断の「認識」の分子生物学-The End is the Beginning
DNA断裂“识别”的分子生物学——结束即是开始
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:小川祐;木村寛之;河嶋秀和;豊田健太郎;向英里;藤本裕之;平尾佳;松田洋和;小野正博;稲垣暢也;佐治英郎;松本義久
- 通讯作者:松本義久
運命を決める「最初の3分間」:DNA二重鎖切断の認識・修復の分子機構の解明と癌放射線治療への応用
决定你命运的“前三分钟”:阐明DNA双链断裂识别与修复的分子机制及其在癌症放疗中的应用
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:H. Tanaka;et. al.;松本義久
- 通讯作者:松本義久
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多能性幹細胞における高LET放射線照射による細胞分裂への影響
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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松本 義久
グルタミン酸受容体機能制御による統合失調症の新規治療法の検討
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- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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- 批准号:
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- 资助金额:
$ 1.98万 - 项目类别:
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08F08468 - 财政年份:2008
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DNA二重鎖切断の認識・修復の分子機構に基づく放射線感受性予測・制御の新戦略体系
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- 批准号:
17689036 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 1.98万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
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17651025 - 财政年份:2005
- 资助金额:
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Grant-in-Aid for Exploratory Research
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- 批准号:
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- 资助金额:
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- 批准号:
16023222 - 财政年份:2004
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14030024 - 财政年份:2002
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13218041 - 财政年份:2001
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11770496 - 财政年份:1999
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Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
相似海外基金
頭頸部がんの放射線治療時における唾液腺防護に関する研究
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- 批准号:
24K10879 - 财政年份:2024
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24K10892 - 财政年份:2024
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