ゼブラフィッシュ嗅上皮における薬物代謝関連分子検出系の水質汚染評価への応用

斑马鱼嗅上皮药物代谢相关分子检测系统在水污染评估中的应用

• 批准号: 17710049
• 负责人: 工藤 秀明
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Hokkaido University (2006-2007)University of Occupational and Environmental Health, Japan (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17710049/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; 嗅上皮; 薬物代謝; 水質汚染; olfactory marker protein; glutathione S-transferase; 免疫組織化学

本研究では,汚染物質が特定できない段階での水質汚染における有害化学物質を検出する簡便なスクリーニング法の開発のための基礎的知見を得ることを目的として,魚類嗅上皮が「生物センサー」として機能する点に着目し,同組織内に存在する薬物代謝関連分子群の発現動態を指標とした水質汚染バイオアッセイ系の構築を試みた。実験には,飼育が容易でかつゲノム遺伝子情報が豊富なことから代替実験動物としても注目されているゼブラフィッシュおよび寒冷地での応用に適したシロザケを用いた。本年度までのタンパク発現解析において,最も水質汚染物質の検出に有効な薬物代謝関連分子であることが示されているグルタチオンS-トランスフェラーゼπ(GST)について,ジゴキシゲニン標識cRNAプローブを用いた in situ ハイブリダイゼーションにより遺伝子レベルの発現解析を両魚種の嗅上皮組織において施行した。その結果,両魚種ともに免疫染色によるタンパク発現同様に線毛性および微絨毛性嗅細胞に遺伝子発現を示すシグナルが観察された。家畜し尿汚染モデルとしてアンモニア,および重金属汚染モデルとしてカドミウム添加飼育水による飼育実験では,アンモニアに対し両魚種とも嗅細胞でGST発現が遺伝子およびタンパクレベルで増加し,さらに嗅細胞以外の嗅上皮構成細胞においてもGST発現が認められた。一方,今回のカドミウム実験では嗅上皮の組織障害が大きく組織化学的なGST発現解析が不可能であった。さらに,より水質汚染物質の検出に有効な薬物代謝関連分子を検索するため,マイクロアレイ用DNAチップ作製に伴う遺伝子情報の収集を行った。

This study で は pollutants が specific で き な い Duan Jie で の water pollution に お け る harmful chemicals を 検 out す る simple な ス ク リ ー ニ ン グ method の open 発 の た め の foundation of knowledge を る こ と を purpose と し て, fish olfactory epithelium が "biological セ ン サ ー" と し て function す る point に mesh し, with tissues に exist す る 薬 material metabolism masato even molecular group Dynamic を indicators と <s:1> た た water quality pollution バ <s:1> アッセ アッセ アッセ <s:1> formation を test みた. Be 験 に は, rearing が easy で か つ ゲ ノ ム heritage 伝 child intelligence が aboundant な こ と か ら instead of be 験 animal と し て も attention さ れ て い る ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ お よ び cold ground で の 応 with に optimum し た シ ロ ザ ケ を with い た. This year's ま で の タ ン パ ク 発 now parse に お い て, most も water pollutants の 検 に there were sharper な 薬 material metabolism masato even molecular で あ る こ と が shown さ れ て い る グ ル タ チ オ ン S - ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ PI (GST) に つ い て, ジ ゴ キ シ ゲ ニ ン logo cRNA プ ロ ー ブ を with い た in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン に よ り posthumous son 伝 レ ベ ル の 発 now parse を struck fish の olfactory epithelial tissue に お い て imposed し た. そ の results, struck fish と も に immune dyeing に よ る タ ン パ ク 発 now with others に wire wool お よ び olfactory cell microvilli sex に heritage 伝 son 発 を now shown す シ グ ナ ル が 観 examine さ れ た. Livestock pollution モ し デ ル と し て ア ン モ ニ ア, お よ び heavy metal pollution モ デ ル と し て カ ド ミ ウ ム add rearing water に よ る rearing be 験 で は, ア ン モ ニ ア に し seaborne struck fish と も olfactory cell で GST 発 now が heritage 伝 son お よ び タ ン パ ク レ ベ ル で raised し, さ ら に olfactory cell outside の olfactory epithelium cells constitute に お い て も GST 発 が now Recognize められた. On the one hand, this time the <s:1> カド カド ウム experiment で で olfactory epithelial <s:1> tissue obstruction が large く く histochemical なGST occurrence analysis が impossible であった. さ ら に, よ り water pollutants の 検 に there were sharper な 薬 material metabolism masato even molecular を 検 cable す る た め, マ イ ク ロ ア レ イ use DNA チ ッ プ cropping に with う heritage 伝 child intelligence の 収 row っ を た.

项目成果

Increased immunoreactivities against endothelin-converting enzyme-1 and monocyte chemotactic protein-1 in hepatic stellate cells of rat fibrous liver induced by thioacetamide.

硫代乙酰胺诱导的大鼠纤维肝肝星状细胞中针对内皮素转换酶 1 和单核细胞趋化蛋白 1 的免疫反应性增加。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Medical Molecular Morphology 38(3)
• 作者: Nagata T;Kudo H;Nishino T;Doi Y;Itoh H;Fujimoto S.
• 通讯作者: Fujimoto S.

Morphological development and molecular expression of the olfactory organ in chum salmon (Oncorynchus keta).

鲑鱼（Oncorynchus keta）嗅觉器官的形态发育和分子表达。

• 发表时间: 2008
• 作者: Kudo;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Strongyloides ratti : thermokinesis of glycolytic enzyme- and lectin-treated third-stage infective larvae in vitro

鼠类圆线虫：体外糖酵解酶和凝集素处理的第三阶段感染性幼虫的热动力

• 发表时间: 2005
• 期刊: Parasitology Research 95・5
• 作者: 近藤康之;高瀬浩二;Yasushi KONDO and Koji TAKASE;Koji TAKASE and Yasushi KONDO;Yasushi KONDO and Koji TAKASE;Yasushi KONDO and Koji TAKASE;今井尚隆ほか;Hiroe Tobata-Kudo他
• 通讯作者: Hiroe Tobata-Kudo他

サケ(Oncorhynchus keta)遊楽部川2個体群の繁殖戦略に関する外部形態比較

有乐部川两个鲑鱼种群繁殖策略的外部形态比较

• 发表时间: 2007
• 期刊: 魚類学雑誌 54
• 作者: Sagawa;Y.;Imai;N.;Kudo;H.;Kaeriyama;M.;今井尚隆・工藤秀明・帰山雅秀
• 通讯作者: 今井尚隆・工藤秀明・帰山雅秀

Strongyloides ratti:: Chemokinesis of glycolytic enzyme- and lectin-treated third-stage infective larvae in vitro

• DOI: 10.1016/j.parint.2005.03.001
• 发表时间: 2005-06-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: Tobata-Kudo, H;Kudo, H;Tada, I
• 通讯作者: Tada, I